| 查看: 2098 | 回复: 5 | ||
| 本帖产生 1 个 MicEPI ，点击这里进行查看 | ||
6105银虫 (小有名气)
|
[求助]
关于原生质体单核化
|
|
| 如果菌丝没有锁状联合，且菌丝是多核的，经过原生质体再生，怎样确定其菌丝是不是单核化的的？ |
回复此楼» 猜你喜欢
308求调剂
已经有4人回复
-
NSFC申报书里申请人简历中代表性论著还需要在申报书最后的附件里面再上传一遍吗
已经有14人回复
-
材料与化工一志愿南昌大学327求调剂推荐
已经有6人回复
-
化学调剂0703
已经有7人回复
-
327求调剂
已经有11人回复
-
调剂
已经有8人回复
-
梁成伟老师课题组欢迎你的加入
已经有7人回复
-
伙伴们，祝我生日快乐吧
已经有24人回复
-
中科院材料273求调剂
已经有3人回复
-
材料工程专硕274一志愿211求调剂
已经有5人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 原核表达问题
已经有14人回复
- 大家来看看这个烟草原生质体里面的细胞器是什么
已经有11人回复
- 拟南芥 原生质体
已经有4人回复
- 真菌及其原生质体的拍照问题
已经有4人回复
- 原生质体单核化问题 急求！！！！！
已经有3人回复
- 【求助/交流】关于原生质体融合的问题
已经有5人回复
- 【求助/交流】原生质体培养
已经有15人回复
- 【求助】看内生真菌的原生质体需要多少倍显微镜可见？形态如何。。
已经有4人回复
HarveyWang
捐助贵宾 (知名作家)
海外行者
- MicEPI: 15
- 应助: 80 (初中生)
- 金币: 2277.2
- 散金: 24
- 红花: 65
- 帖子: 6880
- 在线: 946小时
- 虫号: 528557
- 注册: 2008-03-19
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
【答案】应助回帖
★
感谢参与，应助指数 +1
amisking(金币+6, MicEPI+1): 鼓励积极应助！ 回答每次都很经典啊！ 2012-02-17 18:30:15
6105: 金币+1 2012-04-26 16:46:27
感谢参与，应助指数 +1
amisking(金币+6, MicEPI+1): 鼓励积极应助！ 回答每次都很经典啊！ 2012-02-17 18:30:15
6105: 金币+1 2012-04-26 16:46:27
|
呵呵。。。这正是我几个月前考虑的问题啊。 1. 单核化检验：就是细胞核染色啊。 主要是DAPI和Hoechst 33258，这个有试剂卖的。另外也有用苏木精染色的。 前两种试剂链接：http://www.beyotime.com/c1002.htm http://www.beyotime.com/c1018.htm DAPI是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料。和双链DNA结合后可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光。和EB(ethidium bromide)相比，对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。 DAPI染色常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色。 DAPI的最大激发波长为340nm，最大发射波长为488nm；DAPI和双链DNA结合后，最大激发波长为364nm，最大发射波长为454nm。 Hoechst 33258，也称bisBenzimide H 33258或HOE 33258。分子式为C25H24N6O·3HCl，分子量为533.88，CAS Number 23491-45-4。 Hoechst 33258是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，对细胞的毒性较低。 Hoechst 33258染色常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。Hoechst 33258也常用于普通的细胞核染色，或常规的DNA染色。 Hoechst 33258的最大激发波长为346nm，最大发射波长为460nm；Hoechst 33258和双链DNA结合后，最大激发波长为352nm，最大发射波长为461nm。 本Hoechst 33258染色液可直接用于固定细胞或组织的细胞核染色，也可直接用于活细胞或组织的细胞核染色。 2.如何获得单核原生质：一般是用孢子消化产生原生质体。 孢子在培养5-8小时后，就开始多核化了。所以，要注意孢子的悬浮时间不能过长。这个有相关的论文发表的。 |
2楼2012-02-17 11:16:41
6105
银虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 1359.4
- 散金: 15
- 帖子: 283
- 在线: 20.9小时
- 虫号: 1622212
- 注册: 2012-02-17
- 性别: MM
- 专业: 食用真菌学
3楼2012-02-17 18:29:34
HarveyWang
捐助贵宾 (知名作家)
海外行者
- MicEPI: 15
- 应助: 80 (初中生)
- 金币: 2277.2
- 散金: 24
- 红花: 65
- 帖子: 6880
- 在线: 946小时
- 虫号: 528557
- 注册: 2008-03-19
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
zhang8826857(金币+1): 鼓励交流 2012-02-18 10:12:41
|
是的。 单核的原生质体，那再生萌发以后，很快变成多核。 但是，我们的遗传操作是针对的单核（设为核遗传标记A）原生质体。 在进行遗传操作后，发生了改变，记为A--》B。 生长过程中，就是多核的（BB）、（BBB）等。 遗传标记B 容易在后代传递下去。 如果我们针对的是多核的原生质体，例如（AAA）。 在进行基因插入时，只能使其中一个核发生相同的变化，例如A--》B。 这时原生质体就成了（AAB）。而这个AAB的原生质体，会产生A B两类遗传标记的菌丝体。 如下图示： A A B （AA）（AAA） （AA）（AAA（AAAA） （AB）（BB）（AAB） 相当于我们需要的遗传特征B被稀释了。相当于出现了【杂核】类型。这就是用多核的原生质体进行基因操作，即使第一代成功了，遗传特征也难以传递下去的原因之一。 |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
61054楼2012-02-18 07:10:49
6105
银虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 1359.4
- 散金: 15
- 帖子: 283
- 在线: 20.9小时
- 虫号: 1622212
- 注册: 2012-02-17
- 性别: MM
- 专业: 食用真菌学
5楼2012-02-18 13:54:50
6楼2012-02-18 21:06:15
