应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 蛋白质很纯，但不长晶体
51/1返回列表
查看: 4182  |  回复: 10
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

格格Caroline

新虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白质很纯，但不长晶体

小妹刚刚学习蛋白质结晶，有很多不会的地方。
我做的蛋白350个aa，很纯了，点晶体就是不长，不是直接沉淀了就是透明的，预测了没有什么信号肽之类的，求助啊！！！！！！！就是不长~！！！！我应该在哪些方面在进行改进呢！！！谢谢谢谢！
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

蛋白质实验技术 【分子生物】EPI帖

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼2012-02-14 21:34:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nach

铜虫 (著名写手)

不让吃就去死

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
ph 和沉淀剂浓度 是最先考虑的
赞一下 回复此楼
不让吃就去死
4楼2012-02-15 20:02:05
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

wgl365

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
格格Caroline: 回帖置顶 2012-02-15 20:30:22
格格Caroline: 取消置顶 2012-02-15 20:30:43
你点晶体要用那个筛选试剂盒呀！有很多条件的呀！都不长吗？
赞一下 回复此楼
思想是行动的种子！
2楼2012-02-15 17:12:29
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

BioChemCom

银虫 (小有名气)
格格Caroline: 回帖置顶 2012-02-15 20:26:04
西瓜(金币+3): Good！ 2012-02-15 22:21:27
这个方面的问题，其实挺复杂的，你给出的哦信息也不够明确。我觉得有几件事情需要考虑。
1. 你的蛋白构建是不是够好，两端的无规则序列是否删除了？
2. 就算两端都删除了，还是要做一系列的截断构建，用于探索可能的稳定表达的结构域。这些可以通过已有的晶体结构、生物信息学相关的分析软件来获得信息。
3. 纯化过程，也有一些问题要考虑，温度、Ni-NTA，分子筛和离子柱。

希望有更详细的信息。
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2012-02-15 17:16:51
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

格格Caroline

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
楼: Originally posted by BioChemCom at 2012-02-15 17:16:51:
这个方面的问题，其实挺复杂的，你给出的哦信息也不够明确。我觉得有几件事情需要考虑。
1. 你的蛋白构建是不是够好，两端的无规则序列是否删除了？
2. 就算两端都删除了，还是要做一系列的截断构建，用于探索可 ...

我的蛋白是个乙烯形成酶，我拿软件预测了，应该是没有信号肽之类的，但是不同软件预测的二级结构不同，搞得我想截断也不知道确切去哪里截。

然后...我今天考虑到是不是加点Mn离子 和akg.看能不能长晶体。

再就是，我最后能想出的是 建模之后预测至少有一个二硫键，看加点DTT？
赞一下 回复此楼
5楼2012-02-15 20:28:47
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭