| 查看: 2364 | 回复: 9 | |||
[求助]
求PCR实验流程，小弟是个新手求高手相助
|
| 多谢了。。。 |
回复此楼» 猜你喜欢
材料与化工304求B区调剂
已经有7人回复
-
0703化学336分求调剂
已经有4人回复
-
[复试调剂]西南科技大学国防/材料导师推荐
已经有6人回复
-
化学工程321分求调剂
已经有12人回复
-
211本，11408一志愿中科院277分，曾在中科院自动化所实习
已经有4人回复
-
材料专硕326求调剂
已经有5人回复
-
东南大学364求调剂
已经有5人回复
-
国自科面上基金字体
已经有7人回复
-
药学383 求调剂
已经有4人回复
-
286求调剂
已经有5人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- pcr过程中遇到的诡异现象，求高手解释一下
已经有8人回复
- 求高手指导，用软件设计PCR引物
已经有5人回复
- 求高手帮我分析下 PCR 实验电泳图，怎么改善！！！
已经有6人回复
- PCR高手请进，小女子有事相求，我刚来金币不要嫌少啊，我只有这么多啊，全给你了
已经有20人回复
- 求助高手分析DGGE图谱，附PCR图和DGGE图谱
已经有6人回复
- 向RTPCR高手求助，关于RTPCR的空白对照问题
已经有9人回复
- 急求！小弟第一次投英文，期刊8个月才有答复，但不知道是啥意思，希望高手指导！
已经有15人回复
- 【求助/交流】PCR没有结果，希望高手指教
已经有29人回复
- 【求助/交流】PCR--小弟上图了，帮我看看图
已经有33人回复
- 【求助】求一个gromacs的中文教程，包括安装的部分，小弟新手，从零学起
已经有8人回复
- 【求助/交流】PCR产物切胶回收后可不可以加A尾,做TA克隆，急！希望高手们能帮帮忙！
已经有9人回复
blackrose8089
铁杆木虫 (职业作家)
- 应助: 100 (初中生)
- 贵宾: 0.11
- 金币: 10638.6
- 散金: 155
- 红花: 30
- 沙发: 6
- 帖子: 3702
- 在线: 790.1小时
- 虫号: 614948
- 注册: 2008-09-28
- 专业: 植物学研究的新技术、新方
2楼2012-02-12 13:35:28
3楼2012-02-12 14:11:43
4楼2012-02-12 14:49:08
5楼2012-02-12 18:59:31
tuobaohua
荣誉版主 (文坛精英)
投资理财发言人
- BioEPI: 1
- 应助: 272 (大学生)
- 贵宾: 2.206
- 金币: 9809.6
- 散金: 12632
- 红花: 89
- 沙发: 258
- 帖子: 10236
- 在线: 2595.7小时
- 虫号: 810838
- 注册: 2009-07-17
- 性别: GG
- 专业: 资源化工
- 管辖: 基金申请
6楼2012-02-12 20:42:19
sxxuan
金虫 (著名写手)
- BioEPI: 3
- 应助: 107 (高中生)
- 金币: 3442.4
- 散金: 104
- 红花: 17
- 帖子: 1478
- 在线: 266.1小时
- 虫号: 512865
- 注册: 2008-02-27
- 性别: MM
- 专业: 生物化学
7楼2012-02-13 10:26:34
8楼2012-02-13 10:56:07
kidluag
金虫 (正式写手)
不自信的师生
- 应助: 7 (幼儿园)
- 金币: 1044.5
- 散金: 45
- 红花: 10
- 帖子: 482
- 在线: 38.1小时
- 虫号: 1633228
- 注册: 2012-02-22
- 性别: MM
- 专业: 蔬菜学与瓜果学
|
PCR 体系： 药品 体积（μl） 水 6 Buffer 1 dNTP 0.2 Mg2+cl 0.2 引物（F） 0.5 （R） 0.5 Taq酶 0.1 DNA 1.5 顺序： 水 + Buffer + dNTP + Mg+cl + 引物（F、R） + Taq酶（冰盒，液面下） + 离心混样 + DNA + 离心混样 + 矿物油（10μl竖直滴加）。 PCR： 绿： F1 Enter gax PCR体系(50--25) Run Begin 蓝：Run A Enter 02 SSR Active-Siim Enter 管数（96-x） PCR体系(25-10) 亮 聚丙烯酰胺凝胶电泳： 封口：琼脂糖凝胶封口，两槽30ml 插板后，封住长玻璃板底部，凝固后插进电泳槽。 胶：（配方为50ml两板80ml） 聚丙烯酰胺：20ml，水：25ml，10xTBE,APS(过硫酸铵)：500μl，TEMED：50μl。 顺序：（剧毒）聚丙烯酰胺，10x TBE，水，APS、TEMED,后两样灌胶之前再加入，混匀。 过程：（贴壁）灌满灌胶，有气泡用针头吹，插梳子，如果漏胶，用枪补胶。凝固后，倒入0.5x TBE，中间部分，没过短玻璃，不到长玻璃，两边没过导电管，抜梳子，用针头吹气泡。 点样：PCR后加入6x的加样缓冲液（3.5μl溴酚蓝），点样。 染色所需药品： 固定液：450ml水 + 50ml无水乙醇（95%）+ 2.5ml冰醋酸。 硝酸银：500ml水 + 1g AgNO3(固体，可多不可少)。 硫代硫酸钠：500ml水 + 120μl 10%Na2S2O3溶液（染色前配，易变质）。 显色剂： 500ml水 + 7.5g NaOH + 1.5ml甲醛。 染色顺序： 1、固定（12min） 2、水洗（1次，可无） 3、银染（12min） 4、 Na2S2O3（溶液由无色-棕黄色，不能太深） 5、显色剂（有清晰的带，10min左右） 6、固定液（6-12min） 7、水洗，包膜，拍照 |
9楼2012-02-22 04:42:04
10楼2012-02-22 10:36:36
50