应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求PCR实验流程，小弟是个新手求高手相助
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 2409  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

楼1970-01-01 08:00:00
已阅   申请BioEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

智能机器人

Robot (super robot)

我们都爱小木虫

找到一些相关的精华帖子，希望有用哦~

科研从小木虫开始，人人为我，我为人人

kidluag

金虫 (正式写手)

不自信的师生
PCR 体系：        
药品          体积（μl）
水               6
Buffer            1
dNTP            0.2
Mg2+cl           0.2
引物（F）       0.5
    （R）       0.5
Taq酶           0.1
DNA            1.5
顺序：
        水 + Buffer + dNTP + Mg+cl + 引物（F、R） + Taq酶（冰盒，液面下） + 离心混样 + DNA + 离心混样 + 矿物油（10μl竖直滴加）。
PCR：
绿： F1  Enter  gax  PCR体系(50--25)  Run  Begin
蓝：Run A Enter  02 SSR  Active-Siim    Enter  管数（96-x）  PCR体系(25-10)  亮
聚丙烯酰胺凝胶电泳：
封口：琼脂糖凝胶封口，两槽30ml
      插板后，封住长玻璃板底部，凝固后插进电泳槽。
胶：（配方为50ml两板80ml）
聚丙烯酰胺：20ml，水：25ml，10xTBE,APS(过硫酸铵)：500μl，TEMED：50μl。
顺序：（剧毒）聚丙烯酰胺，10x TBE，水，APS、TEMED,后两样灌胶之前再加入，混匀。
过程：（贴壁）灌满灌胶，有气泡用针头吹，插梳子，如果漏胶，用枪补胶。凝固后，倒入0.5x TBE，中间部分，没过短玻璃，不到长玻璃，两边没过导电管，抜梳子，用针头吹气泡。
点样：PCR后加入6x的加样缓冲液（3.5μl溴酚蓝），点样。
染色所需药品：
        固定液：450ml水 + 50ml无水乙醇（95%）+ 2.5ml冰醋酸。
        硝酸银：500ml水 + 1g AgNO3(固体，可多不可少)。
        硫代硫酸钠：500ml水 + 120μl 10%Na2S2O3溶液（染色前配，易变质）。
        显色剂： 500ml水 + 7.5g NaOH + 1.5ml甲醛。
染色顺序：
1、固定（12min）  2、水洗（1次，可无） 3、银染（12min） 4、 Na2S2O3（溶液由无色-棕黄色，不能太深）  5、显色剂（有清晰的带，10min左右）  6、固定液（6-12min）  7、水洗，包膜，拍照
赞一下 回复此楼
被迫的无知小小博
9楼2012-02-22 04:42:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
百度上搜一下，一堆堆的！
赞一下 回复此楼
jiayoubashaonian
2楼2012-02-12 13:35:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yanggeng

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
看天(金币+2): 鼓励回答 2012-02-12 17:12:57
多试验几次就非常简单了，建议用primer premier设计引物。
赞一下 回复此楼
3楼2012-02-12 14:11:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小猫三两只

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
看天(金币+2): 鼓励交流 2012-02-12 17:12:49
笼统的说就是先设计引物，合成引物，配体系，PCR扩增，检测就行了。具体的细节，你实验室应该很多师兄师姐都做过吧，可以问问他们。多做几次就熟练了。
赞一下 回复此楼
4楼2012-02-12 14:49:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 295求调剂 +15 xndjjj 2026-04-04 16/800 2026-04-06 23:07 by chenzhimin
[考研] 一志愿武理车辆专硕总分 281 求调剂 +3 上岸研究生. 2026-04-02 3/150 2026-04-06 16:46 by 小月儿呀呀
[考研] 308求调剂 +13 倘若起风了呢 2026-04-05 13/650 2026-04-06 14:20 by 蒋皓禹
[考研] 085602调剂 初试总分335 +9 19123253302 2026-04-05 9/450 2026-04-06 06:14 by houyaoxu
[考研] 材料调剂 +14 壹贰贰亿 2026-04-04 14/700 2026-04-05 23:31 by 来看流星雨10
[考研] 0854电子信息319求调剂（接受跨专业调剂） +3 星星不眨眼喽 2026-04-05 3/150 2026-04-05 20:20 by 啵啵啵0119
[考研] 调剂 +5 好好读书。 2026-04-01 5/250 2026-04-05 17:54 by liucky
[考研] 调剂 +3 好好读书。 2026-04-02 3/150 2026-04-05 13:02 by arrow8852
[考研] 083200 333求调剂 +3 十二！！ 2026-04-04 3/150 2026-04-05 08:28 by barlinike
[考研] 344材料与化工调剂 +9 调剂上岸玘 2026-04-03 9/450 2026-04-04 23:10 by happyddm
[考研] 22408，264求调剂 +3 ywh729 2026-04-03 4/200 2026-04-04 11:04 by ywh729
[考研] 材料专业383求调剂 +8 郭阳阳阳成 2026-04-03 8/400 2026-04-04 10:29 by Rednal.
[考研] 考研求调剂 +3 木心想继续深造 2026-04-03 3/150 2026-04-03 21:56 by 啵啵啵0119
[考研] 295求调剂 +3 尚偌呀 2026-04-03 4/200 2026-04-03 21:23 by zhq0425
[考研] 调剂 +5 asdasdassda 2026-04-03 6/300 2026-04-03 20:27 by 岸上的一条鱼
[考研] 274求调剂 +9 顺理成张 2026-04-03 10/500 2026-04-03 15:10 by 啊俊！
[考研] 11408，284分，二战真诚求调剂 +4 12.27 2026-04-02 4/200 2026-04-03 14:14 by dxiaoxin
[基金申请] 请问共同通讯和共同一作的认可度问题 10+4 psa1234 2026-04-01 10/500 2026-04-03 11:08 by Kittylucky
[考研] 生物与医药考研调剂 +5 铁憨憨123425 2026-03-31 5/250 2026-04-01 18:01 by syh9288
[考研] 英一数一总分334求调剂 +4 陈阳坤 2026-03-31 4/200 2026-03-31 14:22 by 记事本2026
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭