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87328068

新虫 (小有名气)

[求助] 请问如何选择5重荧光标记物

我想用5种不同的荧光素分别标记5种单抗,以在同一体系内同时检测5种抗原,请问该选择哪5种荧光素?谢谢!例如通常的双标记法使用FITC和RB-200标记的两种不同抗体,用不同滤光片进行观察,可以在同一体系内同时检测2种抗原。如olympus荧光显微镜,观察FITC标记抗体,激发滤光片用RG-12,压制滤光片用O-350;观察RB-200标记抗体,激发滤光片用UG-1,压制滤光片用R-610。
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87328068

新虫 (小有名气)

恳请哪位牛人解答!
2楼2012-02-08 21:19:49
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1949stone

荣誉版主 (知名作家)

海纳百川

海纳百川止于至善
3楼2012-02-08 22:04:13
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savid888

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
87328068(金币+10): ★★★很有帮助 2012-02-09 11:05:28
小丹木木(金币+3): 鼓励应助哦 2012-02-09 13:47:20
这个肯定不能用普通荧光显微镜来观察了嘛,必须用共聚焦显微镜了。关于荧光素的选择,你可以参照invitrogen的网页,它的molecular probe系列是你的理想选择,只要是发射波长不互相干扰的你就可以用了。
4楼2012-02-09 09:55:34
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savid888

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

87328068(金币+10): 2012-02-09 11:05:36
5楼2012-02-09 09:58:35
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87328068

新虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by savid888 at 2012-02-09 09:55:34:
这个肯定不能用普通荧光显微镜来观察了嘛,必须用共聚焦显微镜了。关于荧光素的选择,你可以参照invitrogen的网页,它的molecular probe系列是你的理想选择,只要是发射波长不互相干扰的你就可以用了。

请问不能用普通荧光显微镜是基于何种考虑?我这方面完全外行,敬请赐教。为何双标记法使用FITC和RB-200标记可以用普通荧光显微镜呢?还有,除了共聚焦显微镜,全内反射荧光显微镜可以吗?
6楼2012-02-09 11:05:11
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87328068

新虫 (小有名气)

自己顶一下。
7楼2012-02-09 14:20:44
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savid888

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
小丹木木(金币+2): 鼓励应助哦 2012-02-10 13:37:48
87328068(金币+10): ★★★很有帮助 衷心感谢! 2012-02-12 08:42:13
普通的荧光显微镜一般只有三个通道,对应3种荧光,你要5种,显然不够啊。而共聚焦显微镜就不一样了,它可以任意设定收集荧光的波长范围,能满足你的要求。至于全内反射荧光显微镜,不太了解,不敢贸然回答。
8楼2012-02-10 10:33:16
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chimindu

木虫 (小有名气)

荧光DuBoss


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我是北京泛博公司生物化学有限公司的,国内唯一一家做荧光探针和荧光染料的公司, 请联系杜池敏博士, 13661314499.
9楼2012-02-10 11:13:23
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涯雅

新虫 (初入文坛)

帮顶下
10楼2012-02-10 12:01:04
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