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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 请问如何选择5重荧光标记物
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87328068

新虫 (小有名气)

[求助] 请问如何选择5重荧光标记物

我想用5种不同的荧光素分别标记5种单抗，以在同一体系内同时检测5种抗原，请问该选择哪5种荧光素？谢谢！例如通常的双标记法使用FITC和RB-200标记的两种不同抗体，用不同滤光片进行观察，可以在同一体系内同时检测2种抗原。如olympus荧光显微镜，观察FITC标记抗体，激发滤光片用RG-12，压制滤光片用O-350；观察RB-200标记抗体，激发滤光片用UG-1，压制滤光片用R-610。
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1楼 2012-02-08 20:36:42
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87328068

新虫 (小有名气)
恳请哪位牛人解答！
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2楼2012-02-08 21:19:49
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1949stone

荣誉版主 (知名作家)

海纳百川
帮顶
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海纳百川止于至善
3楼2012-02-08 22:04:13
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savid888

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
87328068(金币+10): ★★★很有帮助 2012-02-09 11:05:28
小丹木木(金币+3): 鼓励应助哦 2012-02-09 13:47:20
这个肯定不能用普通荧光显微镜来观察了嘛，必须用共聚焦显微镜了。关于荧光素的选择，你可以参照invitrogen的网页，它的molecular probe系列是你的理想选择，只要是发射波长不互相干扰的你就可以用了。
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4楼2012-02-09 09:55:34
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savid888

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

87328068(金币+10): 2012-02-09 11:05:36
把两个链接贴出来了，供你参考。
http://zh.invitrogen.com/site/cn ... lecular-Probes.html

http://zh.invitrogen.com/site/cn ... s-the-Spectrum.html
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5楼2012-02-09 09:58:35
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87328068

新虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by savid888 at 2012-02-09 09:55:34:
这个肯定不能用普通荧光显微镜来观察了嘛，必须用共聚焦显微镜了。关于荧光素的选择，你可以参照invitrogen的网页，它的molecular probe系列是你的理想选择，只要是发射波长不互相干扰的你就可以用了。

请问不能用普通荧光显微镜是基于何种考虑？我这方面完全外行，敬请赐教。为何双标记法使用FITC和RB-200标记可以用普通荧光显微镜呢？还有，除了共聚焦显微镜，全内反射荧光显微镜可以吗？
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6楼2012-02-09 11:05:11
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87328068

新虫 (小有名气)
自己顶一下。
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7楼2012-02-09 14:20:44
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savid888

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
小丹木木(金币+2): 鼓励应助哦 2012-02-10 13:37:48
87328068(金币+10): ★★★很有帮助 衷心感谢！ 2012-02-12 08:42:13
普通的荧光显微镜一般只有三个通道，对应3种荧光，你要5种，显然不够啊。而共聚焦显微镜就不一样了，它可以任意设定收集荧光的波长范围，能满足你的要求。至于全内反射荧光显微镜，不太了解，不敢贸然回答。
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8楼2012-02-10 10:33:16
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chimindu

捐助贵宾 (正式写手)

荧光DuBoss

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我是北京泛博公司生物化学有限公司的,国内唯一一家做荧光探针和荧光染料的公司, 请联系杜池敏博士, 13661314499.
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9楼2012-02-10 11:13:23
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涯雅

新虫 (初入文坛)
帮顶下
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10楼2012-02-10 12:01:04
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