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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】指教：目标细菌进行荧光标记~非常感谢！
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jss0108

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】指教：目标细菌进行荧光标记~非常感谢！ 已有3人参与

如何对目标细菌进行绿色荧光蛋白标记，求实验过程，请各位大侠指教
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我是俗世里的一粒微尘，一个深呼吸，所有烦恼全没了！
1楼 2010-12-15 10:08:39
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feiye2214

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):谢谢交流 2010-12-15 11:14:33
引用回帖:
Originally posted by jss0108 at 2010-12-15 10:08:39:
如何对目标细菌进行绿色荧光蛋白标记，求实验过程，请各位大侠指教

之前带本科生去杭州参加竞赛，宁大的学生就是做这个的，把EGFP基因装载到表达质粒上，转化进入目标细菌细胞内，然后诱导表达EGFP，用发光的菌去感染鱼，然后发现它的感染路径
考虑下吧
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2楼2010-12-15 10:42:50
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jss0108

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by feiye2214 at 2010-12-15 10:42:50:

之前带本科生去杭州参加竞赛，宁大的学生就是做这个的，把EGFP基因装载到表达质粒上，转化进入目标细菌细胞内，然后诱导表达EGFP，用发光的菌去感染鱼，然后发现它的感染路径
考虑下吧

非常感谢，我们要做的东西和这个研究思路是一样的，不过我们的是植物，还想请教一下，你知道具体的实验过程吗？谢谢了
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我是俗世里的一粒微尘，一个深呼吸，所有烦恼全没了！
3楼2010-12-15 11:40:21
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scelab

荣誉版主 (文坛精英)

小木虫之有关部门负责人
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dhd997(金币+1):鼓励交流 2010-12-16 13:01:44
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Originally posted by jss0108 at 2010-12-15 11:40:21:



非常感谢，我们要做的东西和这个研究思路是一样的，不过我们的是植物，还想请教一下，你知道具体的实验过程吗？谢谢了

前面制备发光细菌的过程一样
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小木虫之有关部门负责人
4楼2010-12-15 12:12:27
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jss0108

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by scelab at 2010-12-15 12:12:27:

前面制备发光细菌的过程一样

呵呵，这样啊，谢谢哦
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我是俗世里的一粒微尘，一个深呼吸，所有烦恼全没了！
5楼2010-12-16 11:12:43
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feiye2214

木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+3):鼓励积极参与~~~ 2010-12-16 18:21:50
引用回帖:
Originally posted by jss0108 at 2010-12-15 11:40:21:



非常感谢，我们要做的东西和这个研究思路是一样的，不过我们的是植物，还想请教一下，你知道具体的实验过程吗？谢谢了

你的思路肯定是这样的，向目标菌转化携带EGFP质粒，诱导表达EGFP蛋白，再把成功表达EGFP的菌去感染健康的植物，寻找感染过程中的各事件！
选好正确的表达质粒，成功诱导是构建标记细菌的关键，你们做植物的，前面搞菌这几步应该与我们大致相似，怎么去转染植物，那我就不晓得了
多做些平行，多选一些表达质粒，祝早日出结果
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6楼2010-12-16 15:13:12
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jss0108

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by feiye2214 at 2010-12-16 15:13:12:

你的思路肯定是这样的，向目标菌转化携带EGFP质粒，诱导表达EGFP蛋白，再把成功表达EGFP的菌去感染健康的植物，寻找感染过程中的各事件！
选好正确的表达质粒，成功诱导是构建标记细菌的关键，你们做植物的，前 ...

非常感谢大侠指点！
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我是俗世里的一粒微尘，一个深呼吸，所有烦恼全没了！
7楼2010-12-17 16:21:05
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