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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR产物经酶切电泳后所得的基因型与测序结果不一致，是何原因？该如何处理？
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hotmail

木虫 (小有名气)

银虫

[求助] PCR产物经酶切电泳后所得的基因型与测序结果不一致，是何原因？该如何处理？

PCR产物经酶切电泳后所得的基因型与测序结果不一致，是何原因？该如何处理？
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银虫
1楼 2012-01-26 16:22:10
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hotmail

木虫 (小有名气)

银虫
西瓜: 回帖置顶 2012-01-28 13:45:46
引用回帖:
楼: Originally posted by guojianping at 2012-01-27 20:24:09:
（1）是不是P错位置？可能P的大小一样，但是P错了地方，引物问题。可能有个基因和你的目的基因的引物段相似，大小也相似。我碰到过
（2）把你的问题好好说清楚，不行就上图，这样很难理解

三个样品，经同一批PCR后，所得产物经酶切并电泳后，明显分出不同的条带，即有三个基因型，如果将各相应原PCR产物测序应有不同的基因序列，但是我测序的结果却是相同的，就上此不解。
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银虫
7楼2012-01-28 11:27:18
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Charles-glh

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜(金币+3): 鼓励交流~ 2012-01-27 05:40:04
电泳后的也要测序啊，为什么看不明白你说的什么意思？你是对比已经测序的序列?
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2楼2012-01-26 21:26:20
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hotmail

木虫 (小有名气)

银虫
引用回帖:
楼: Originally posted by Charles-glh at 2012-01-26 21:26:20:
电泳后的也要测序啊，为什么看不明白你说的什么意思？你是对比已经测序的序列?

酶切产物经电泳后有三种基因型，CC\CT\TT，分别将三种基因型的PCR产物直接测序，测序结果三者都看不出有没有什么不同。
酶切后的产物不需要测序吧？
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银虫
3楼2012-01-27 10:18:30
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hyhl

铁杆木虫 (小有名气)
★ ★
西瓜(金币+2): 鼓励交流 2012-01-27 12:57:50
引用回帖:
3楼: Originally posted by hotmail at 2012-01-27 10:18:30:
酶切产物经电泳后有三种基因型，CC\CT\TT，分别将三种基因型的PCR产物直接测序，测序结果三者都看不出有没有什么不同。
酶切后的产物不需要测序吧？

你的实验目的究竟是什么呢？酶切能区分你所说的三种基因型吗？
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4楼2012-01-27 12:36:23
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