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金虫 (正式写手)

[求助] HPLC定量问题-很奇怪

HPLC新手
absorbance检测器,测任何一种物质,包括标准物,都出现下面的情况,跑第一遍的峰面积最小,同样的物质第二遍峰面积增大将近2倍,第3遍峰面积又增大一些,第4遍以及后面的无论多少遍峰面积达到最大,而且峰面积是不变的

不知道我说清楚没有,反正是太奇怪了,大家有没有什么想法?
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金虫 (正式写手)

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2楼: Originally posted by saintcecilia at 2012-01-19 09:24:44:
是不是上样前柱子没有平衡好?

怎么能让平衡好呢?
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4楼2012-01-19 11:54:50
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金虫 (正式写手)

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3楼: Originally posted by wqs43 at 2012-01-19 09:30:19:
不知道楼主的压力有没有波动?我觉得造成这种现象最主要原因就是手动进样六通阀内部有堵塞!第一次进样时真正进到定量环的样品量不够,多进几次(也就是多切换了几下六通阀),阀内部疏通,这样后面真正进样量就正 ...

进样都是自动的啊

比如说测样品1测第4次才能平衡,紧接着就测第2个样品,结果还得是第4次才平衡,你说奇怪么
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5楼2012-01-19 11:56:43
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金虫 (正式写手)

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5楼: Originally posted by annietop at 2012-01-19 11:56:43:
进样都是自动的啊

比如说测样品1测第4次才能平衡,紧接着就测第2个样品,结果还得是第4次才平衡,你说奇怪么

在多说一些,比如再紧接着测样品3,测完3次后,这3次的峰面积还是逐渐递增,这时候再测样品4,测完样品4再返回去测样品3,无论测几次都是这平衡的,似乎该仪器有什么记忆功能似的,实在是觉得有意思
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6楼2012-01-19 12:00:54
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金虫 (正式写手)

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7楼: Originally posted by wqs43 at 2012-01-19 12:01:24:
我前面以为是手动进样。自动进样也是进样器的问题。不知道楼主自己会不会拆装?建议楼主把进样器拆下来,里面部件分别用水、甲醇在超声波里清洗一下,再装回去试试看。

我可以找人帮我拆装,象你说的清洗一下
只是你不觉得很奇怪么?
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8楼2012-01-20 00:40:33
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金虫 (正式写手)

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9楼: Originally posted by zulovexin at 2012-01-20 11:45:42:
不是进样器的问题,我觉得你应该跑的是剃度吧,我以前也遇过了类似的问题,前几次的进样是柱子没有被样品饱和,所以出峰很不稳定,有时甚至出峰时间都会有变化,但是平衡几针之后就很稳定了!!所以不用太担心! ...

听着觉得像,那这个梯度是从哪里可以设置呢?
我这个的出峰时间每次都是一致的
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10楼2012-01-20 12:40:42
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金虫 (正式写手)

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11楼: Originally posted by zz831024 at 2012-01-20 14:45:30:
1.楼主你的色谱峰保留时间一致吗?不一致的话可能是泵的问题,或者是没有平衡好,如果一致,请看2
2.你把色谱柱拆下来,接上二通,梯度改成等度,然后进样,会很快出峰,你再比较比较每一针的峰面积,如果没有问 ...

保留时间都是一致的

我再补充一下,其实每次盛放样品的小瓶子只要换成新的就会出现这个问题,但是只要用过3次以后,就不存在这个问题了。这是怎么回事?
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13楼2012-01-25 02:19:26
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金虫 (正式写手)

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12楼: Originally posted by zulovexin at 2012-01-22 21:43:33:
在泵运行控制上,你的流动相是几相?

是2相
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14楼2012-01-25 02:19:54
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金虫 (正式写手)

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15楼: Originally posted by zz831024 at 2012-01-25 09:52:50:
小瓶子是新的?瓶子新的?那么隔垫呢?如果隔垫换新的就出问题,那么可以考虑是不是隔垫的问题。

小瓶子和隔垫都是新的,那出现这种情况和隔垫是什么关系呢?难道注射的样品被隔垫吸收了?
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16楼2012-01-25 14:01:56
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金虫 (正式写手)

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17楼: Originally posted by zulovexin at 2012-01-28 13:04:41:
你不是做分析的吧?
希望您能把你的问题说得更清楚一点,比如您的样品的结构,流动相,流速,色谱柱型号等等,越详细越好,这样才方便我们帮助您解决问题!!谢谢!!

我一开始不也说明了嘛,新手

被测物是葡萄糖为主的碳酸化合物,C18柱子
流动相:acetonitrile +水
流速:1ml/min

谢谢!
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18楼2012-02-01 09:02:06
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