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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » HPLC定量问题－很奇怪
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annietop

金虫 (正式写手)

[求助] HPLC定量问题－很奇怪

HPLC新手
absorbance检测器，测任何一种物质，包括标准物，都出现下面的情况，跑第一遍的峰面积最小，同样的物质第二遍峰面积增大将近２倍，第３遍峰面积又增大一些，第４遍以及后面的无论多少遍峰面积达到最大，而且峰面积是不变的

不知道我说清楚没有，反正是太奇怪了，大家有没有什么想法？
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Insist forever!
1楼 2012-01-19 08:48:56
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annietop

金虫 (正式写手)
引用回帖:
11楼: Originally posted by zz831024 at 2012-01-20 14:45:30:
1.楼主你的色谱峰保留时间一致吗？不一致的话可能是泵的问题，或者是没有平衡好，如果一致，请看2
2.你把色谱柱拆下来，接上二通，梯度改成等度，然后进样，会很快出峰，你再比较比较每一针的峰面积，如果没有问 ...

保留时间都是一致的

我再补充一下，其实每次盛放样品的小瓶子只要换成新的就会出现这个问题，但是只要用过３次以后，就不存在这个问题了。这是怎么回事？
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Insist forever!
13楼2012-01-25 02:19:26
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saintcecilia

木虫 (小有名气)
是不是上样前柱子没有平衡好？
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2楼2012-01-19 09:24:44
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wqs43

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西湖醉鱼(金币+1): 欢迎来到分析版指导 2012-01-19 09:58:21
annietop(金币+5): ★★★很有帮助 谢谢提供有用信息～ 2012-02-07 13:07:17
不知道楼主的压力有没有波动？我觉得造成这种现象最主要原因就是手动进样六通阀内部有堵塞！第一次进样时真正进到定量环的样品量不够，多进几次（也就是多切换了几下六通阀），阀内部疏通，这样后面真正进样量就正常了，也就是楼主说的第四遍后峰面积不变的原因。建议楼主每次做样前先空切换几次六通阀，使其内部疏通，这样做样品时就会正常。楼主试试吧。
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3楼2012-01-19 09:30:19
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annietop

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by saintcecilia at 2012-01-19 09:24:44:
是不是上样前柱子没有平衡好？

怎么能让平衡好呢？
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Insist forever!
4楼2012-01-19 11:54:50
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