| 查看: 3516 | 回复: 1 | |||
| 本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看 | |||
[求助]
反向PCR引物设计
|
|||
| 反向PCR引物怎样设计？需要注意些什么？ |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 【分子生物】EPI帖 |
» 猜你喜欢
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有74人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
留学--博士招生
已经有15人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- PCR-DGGE的引物设计
已经有5人回复
- 做过overlap PCR的虫子过来看看
已经有19人回复
- pcr过程中遇到的诡异现象，求高手解释一下
已经有8人回复
- 求助引物设计方法，请高手帮忙指点迷津。。。万分感谢
已经有4人回复
- 反向PCR之单引物扩增，真悲剧
已经有15人回复
- 悬赏引物设计问题
已经有12人回复
- 【求助/交流】RACE引物设计
已经有5人回复
- 【求助/交流】反向PCR的问题
已经有11人回复
- 求高人帮我设计两段序列的PCR引物
已经有1人回复
yabxxh
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 14
- 应助: 22 (小学生)
- 贵宾: 0.005
- 金币: 2238
- 散金: 98
- 红花: 9
- 帖子: 465
- 在线: 88.6小时
- 虫号: 157001
- 注册: 2006-01-05
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜(金币+5, MolEPI+1): 解释很清楚，学习了！ 2012-01-13 18:14:41
longyh6411(金币+10): ★★★★★最佳答案 谢谢 2012-01-14 00:06:13
感谢参与，应助指数 +1
西瓜(金币+5, MolEPI+1): 解释很清楚，学习了！ 2012-01-13 18:14:41
longyh6411(金币+10): ★★★★★最佳答案 谢谢 2012-01-14 00:06:13
|
反向PCR的定义啥的我也就不说了，它主要的用途是扩增一段已知片段两端的序列，从而对其进行分析。 一般的做法是用已知片段内没有的内切酶进行相应DNA片段的单酶切，然后用T4连接酶连接起单切的这段DNA成环，可选步骤就是选一个该已知片段内的单酶切位点进行线性化，个人感觉这一步没有必要。 最后就是反向引物的设计了，常规PCR是对片段5'段设计正向引物，3'端设计反向引物。而反向PCR则是对该已知片段的5'端设计反向引物，3'端设计正向引物，以保证对已知片段两侧进行扩增。 引物的设计方法同常规PCR，如果你对常规PCR引物设计有疑问，请查看本论坛的相关帖子。 如还有疑问请跟帖说明。 祝好运。 |
2楼2012-01-13 15:44:43
