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liuliang_045

木虫 (正式写手)

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[交流] 酪氨酸酶的比色法测定活力已有1人参与

我按照文献做酪氨酸酶的比色法测定活力，再添加不同比例的抑制剂来对比活力变化，底物是酪氨酸，显色反应一直做不出来。
37度反应30min，溶液并没有明显的变色，分光光度法测量起来误差好大的
所以我做出来的显色反应都没有办法正常的测定，测出来的数据没有什么规律啊？
酪氨酸的溶解度好低，后来我想提高一下底物的量，结果大部分酪氨酸都不溶于水，我尝试了大量的底物在长时间下的反应，最后有很多黑色沉淀，应该说明有酶反应，但是产物也是沉淀，比色法测溶液还是不明显呢。
究竟这个显色反应有什么要点吗？酪氨酸酶只有一点点，浪费几次就没有了呢。还请大家帮帮忙啦。

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1楼 2012-01-12 15:39:41

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航joyce

银虫 (小有名气)

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★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖

我最近在做这个，酪氨酸酶的反应时间好想不能太长的，如果颜色没有太大变化那就是酶的活力太低了--加入的酶少或者保存不当失活了。
酪氨酸酶本来就不是很溶于水的。一般都是加水后超声，过滤得澄清溶液。反应的条件要自己慢慢摸的。

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早睡早起身体好

2楼2012-03-19 19:13:25