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足下客

木虫 (正式写手)

[求助] 寻找做过用Luminex(流式荧光技术、液相悬浮芯片)测mRNA表达量的同行

我们实验室去年八月份刚买了一台Luminex 200,用来测肿瘤组织样本的一些靶标的mRNA表达量,以石蜡切片样本居多。现在检测了二十多例样本了,但是数值都比较低,只有一次高表达看家基因的原始MFI达到了八千多。剩下的样本看家基因的值从几十到几百不等。我想问一下做过这种实验的同行,你们测石蜡切片样本的mRNA表达量时,大部分情况下MFI值都很高吗?
老板总说我们测出来的数不准,但是他都没有跟其他实验室的结果做比较的,所以我想了解一下同行的数值高低,也好发现自己的问题出在哪里。
我们用的是Affymetrix的试剂盒,原理是分支DNA技术。杂交过程都是严格按说明书操作的。
不同的取样量都试过了,影响都不大。
期盼着高手的解答。
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sunxianbiao

铜虫 (小有名气)

我们做了大概有10000多例了,有石蜡包埋、福尔马林固定各组织样本,效果都不错。取的样本量不能太多,B2M有时会高于24000,5个/3个看家基因都需要考虑,B2M在6000~18000值比较好。
加油
2楼2012-12-26 14:04:49
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