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ssp4023

新虫 (著名写手)

[求助] 关于血红蛋白的使用

求助啊。。。。
我最近在做关于血红蛋白的实验,但是做出来的结果和文献报道不一样。
文献报道血红蛋白在紫外可见光光谱中,在540nm,570nm,630nm处有吸收,分别为氧合血红蛋白和高铁血红蛋白的吸收峰,但是我的血红蛋白溶液却在这三个波长处没有吸收,不知道是我的试剂的问题还是我操作有问题,华东理工的刘昌盛老师做的很多,都是用上海源聚生物公司的试剂,他的文献上都是有吸收峰的。我也是用上海源聚的,怎么做都没有,难道要用sigma的?求助大虾,有做过相关实验的鼎力相助啊!!!
非常感谢,但是我是新手,金币少,不好意思!
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pursuing

金虫 (正式写手)

mwyuer(金币+1): 谢谢 2012-02-22 20:18:11
引用回帖:
3楼: Originally posted by ssp4023 at 2012-01-10 18:04:06:
我是把血红蛋白溶解在水里,但是只在400左右有个比较强的吸收峰,其他地方没有。500多地方要怎样才有吸收峰啊?谢谢了。

可能你的溶液浓度太低了,也可能你配的溶液已经氧化成高铁态了,高铁态的紫外光谱和pH有关,你配时最好加点还原剂,避免接触氧气
潜心做研究
4楼2012-01-12 17:25:12
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pursuing

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
是有吸收峰的,你的样品在400多有没有吸收峰,你用的什么溶剂
潜心做研究
2楼2012-01-10 16:43:55
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ssp4023

新虫 (著名写手)

引用回帖:
: Originally posted by pursuing at 2012-01-10 16:43:55:
是有吸收峰的,你的样品在400多有没有吸收峰,你用的什么溶剂

我是把血红蛋白溶解在水里,但是只在400左右有个比较强的吸收峰,其他地方没有。500多地方要怎样才有吸收峰啊?谢谢了。
3楼2012-01-10 18:04:06
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ssp4023

新虫 (著名写手)

引用回帖:
: Originally posted by pursuing at 2012-01-12 17:25:12:
可能你的溶液浓度太低了,也可能你配的溶液已经氧化成高铁态了,高铁态的紫外光谱和pH有关,你配时最好加点还原剂,避免接触氧气

浓度大概在1mg/ml,应该算是高了吧?我也加了还原剂连二亚硫酸钠,高铁态还跟PH值有关啊?请问您是否做过这个实验,在540,570,630nm处都能有吸收峰吗?高手指点指点啊!
5楼2012-01-13 13:14:24
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