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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 急求，t-rflp的酶切产物能在2%的琼脂糖凝胶上跑出条带吗？
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旋之木

新虫 (初入文坛)

[求助] 急求，t-rflp的酶切产物能在2%的琼脂糖凝胶上跑出条带吗？

我将纯化后的PCR产物进行酶切，然后在2%的琼脂糖上80v跑电泳1小时。但是没有条带，请问高手，是因为琼脂糖分辨不出来，还是有什么问题呢？
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1楼 2012-01-07 16:45:49
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double_chin

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
酶切后的片段大小大概是多大？如果是小胶的话估计跑过了。也可能是纯化后你的PCR产物损失了，一般都要P三管混合后在纯化......我做的都能跑出来，没什么问题
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放飞自己
8楼2012-03-23 17:05:24
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痴客

木虫 (正式写手)

吃货250

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
zhang8826857(金币+1): 鼓励应助 2012-01-08 18:35:19
t-rflp的产物没有跑过，不过普通电泳如果跑1h会有很比较大的弥散，平时跑电泳都是120v，30min~35min；即使是V3这种短片段也是
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因为这个世界上这么多的狼，我这只牧羊犬只好放弃我的温顺，向着这个世界放出最耀眼的光。
2楼2012-01-08 00:00:41
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girlfisher

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
zhang8826857(金币+1): 鼓励交流 2012-01-08 18:35:26
RFLP是能跑出来，T-RFLP由于是引物本身自带荧光，如果不染色就不一定了

marker没问题吧？
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2012-01-08 11:12:43
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旋之木

新虫 (初入文坛)
marker是没有问题的，是用EB染过的
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4楼2012-01-08 18:13:22
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