应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 用提取DNA做Genotyping的 PCR问题求助，谢谢@！
21/1返回列表
查看: 1652  |  回复: 1
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

鹰羽

铁虫 (初入文坛)

[求助] 用提取DNA做Genotyping的 PCR问题求助，谢谢@！

替朋友求助，最近她在用小鼠尾巴提取的DNA做转基因鼠的genotyping PCR，但是一直没有目的条带，但是小鼠里肯定有杂合子的。其实应该是很成熟的方法，引物和条件都是成熟的。

再往前一段时间做的时候，第一次没做出来，第二次做出来过也就用普通的buffer，也没有什么特别。但是最近做了很多次都是目的条带没有，但是有的小鼠有非特异带，不是每个小鼠都有（有时候有很多条，有时候只在100多bp处有，目的条带应该在300bp），应该说明DNA没有问题吧。有时候100bp的带每个都有，也肯定不是引物二聚体，因为前面有二聚体条带。，她试过很多种buffer了，用得2Xbuffer 或者别人能做出来的几种buffer都试过了，还是如此。也试过降落PCR。重新提取的DNA也没有做出来。焦虑万分。请问高手会有什么问题？
DNA模板量过高或者过低？酚或乙醇残留？还是循环数过多？还是手法什么的原因？急盼回复！！
万分感谢！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-12-23 08:54:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

鹰羽

铁虫 (初入文坛)
谢谢智能机器人！
但是DNA提起应该没有什么问题，我们需要的是别人能给予技术上能指导一下，因为我同时做了几个genotyping，就这一个没出来，别的DNA没有那么大问题，这个应该也不会有吧。
但是谢谢你的帮助！
赞一下 回复此楼
2楼2011-12-23 09:52:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 鹰羽 的主题更新
21/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭