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有木有人做过Taqman 探针法Real-Time？？ 已有1人参与
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| 我要检测基因组中插入的某个外源片段的拷贝数，需要做绝对定量。师兄建议不要用sybr 燃料做，建议用探针法做。现在毫无头绪，不知道怎么设计，怎么合成？望各位高人指点一下…… |
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sandisk411
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【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
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单拷贝就是染色体上只有1处有外源基因。遗传背景这个词可能不是很好，容易让人混淆。我举个T-DNA转基因水稻吧，比如是转基因出来的当代是T0代水稻，其自交获得的下一代就是T1代，以此类推就是T2代，T3代.......。 在T0代时就检测拷贝数是最方便解释的，因为T-DNA框只在1条同源染色体上插入，所以插入目的基因与参考基因（基因组里单拷贝）的比值应是1:2；双拷贝的，就该是1:1； 如果是T1代的苗，比值是1:1的话，可能是单拷贝插入株的纯合植株，也可能是双拷贝植株的杂合株了。 所以，你需要知道你的材料是种植第几代了，是否是所谓的纯合了。我不知道你做的是什么材料，是水稻的话，做SOURTHERN不难的。 |
19楼2011-12-26 08:18:25
2楼2011-12-22 16:45:28
shaquila
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3楼2011-12-22 18:04:14
4楼2011-12-22 19:37:05