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lixingliang

新虫 (小有名气)

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[交流] MluⅠ和BamH Ⅰ双酶切问题已有2人参与

本人最近构建克隆，用MluⅠ和BamH Ⅰ双酶切后作连接，但总是连不上。用的是NEB公司的酶，50微升体系，各1微升的内切酶，酶切两个半小时，跑胶后条带很怪异，总是出现拖尾现象，不知为啥，请大家帮忙看看。
我的疑问有两个：
一电泳图谱拖带现象说明酶切有问题而导致连接失败
二酶切时间我是两个半小时，说明书上市标准时间一小时，不知道大家都多长时间？？？谢谢

胶回收图-由左向右依次是：marker 目的条带质粒

双酶切图-由左向右依次是：目的条带 marker 质粒

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我不管你看起看不起我，我都是个演员

1楼 2011-12-20 22:13:43

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

MMMMMMO

新虫 (初入文坛)

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引用回帖:

2楼: Originally posted by lixingliang at 2011-12-22 22:22:55
是不是我发错地方了，没有一个人留言啊
呵呵，自己给自己回复吧
这个问题解决了，今天早上板子长满了，菌液pcr鉴定条带正确，明天做酶切鉴定，应该没有问题。
不过至于以前为啥没成功，我也不清楚，或许实验就是 ...

我想请问一下是怎么解决的啊

发自小木虫Android客户端