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lixingliang

新虫 (小有名气)

[交流] MluⅠ和BamH Ⅰ双酶切问题 已有2人参与

本人最近构建克隆,用MluⅠ和BamH Ⅰ双酶切后作连接,但总是连不上。用的是NEB公司的酶,50微升体系,各1微升的内切酶,酶切两个半小时,跑胶后条带很怪异,总是出现拖尾现象,不知为啥,请大家帮忙看看。
我的疑问有两个:
一 电泳图谱拖带现象说明酶切有问题而导致连接失败
二 酶切时间我是两个半小时,说明书上市标准时间一小时,不知道大家都多长时间???谢谢

胶回收图-由左向右依次是:marker 目的条带 质粒



双酶切图-由左向右依次是:目的条带 marker  质粒
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lixingliang

新虫 (小有名气)

是不是我发错地方了,没有一个人留言啊
呵呵,自己给自己回复吧
这个问题解决了,今天早上板子长满了,菌液pcr鉴定条带正确,明天做酶切鉴定,应该没有问题。
不过至于以前为啥没成功,我也不清楚,或许实验就是这样吧。
我不管你看起看不起我,我都是个演员
2楼2011-12-22 22:22:55
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MMMMMMO

新虫 (初入文坛)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by lixingliang at 2011-12-22 22:22:55
是不是我发错地方了,没有一个人留言啊
呵呵,自己给自己回复吧
这个问题解决了,今天早上板子长满了,菌液pcr鉴定条带正确,明天做酶切鉴定,应该没有问题。
不过至于以前为啥没成功,我也不清楚,或许实验就是 ...

我想请问一下是怎么解决的啊

发自小木虫Android客户端
3楼2018-01-11 21:18:30
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1006641214

木虫 (正式写手)

wublab

你好
4楼2018-01-11 22:37:43
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