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melody_boy

木虫 (小有名气)

[交流] 关于血浆蛋白结合率的一点问题已有6人参与

最近在看血浆蛋白结合率的测定的相关文献,想请教下用平衡透析法测时,其膜可透过的分子量选择是根据我的药物的分子量来定的?若是,那么应该是比我药物的分子量大多少合适。再有这种方法和超滤离心法相比哪种方法较好呢
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sdd815

银虫 (初入文坛)

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karl2100(金币+1): 谢谢回复! 2011-12-22 00:33:42
膜可透过的分子量应该是你想要截留蛋白分子量的1/2或者1/3,对于这两种方法各有各的优缺点,但是对于吸附较强的药可以选用超滤法,并且超滤法比较省时
2楼2011-12-21 09:50:21
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melody_boy

木虫 (小有名气)


leecius(金币+1): 谢谢参与。 2011-12-22 08:22:16
引用回帖:
: Originally posted by sdd815 at 2011-12-21 09:50:21:
膜可透过的分子量应该是你想要截留蛋白分子量的1/2或者1/3,对于这两种方法各有各的优缺点,但是对于吸附较强的药可以选用超滤法,并且超滤法比较省时

额 同学你好!请问你做过这种实验没?!我没有做过想请教下,我看了些文献意思是药物从溶液往膜里的血浆里进并达到平衡,是这样的不?那按你的说法如果我的分子量是1000,那膜是不是至少是1500?!缓冲溶液的配制是固定方法么?!
3楼2011-12-22 00:01:30
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期待

金虫 (小有名气)

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xiaoxiao270(金币+1): 3Q 2012-02-08 20:43:55
超滤管的吸附比较强,再有就是我用的30K的超滤管 直接滤不过去
透析膜也有从里边往外透析的看情况
4楼2011-12-22 14:28:47
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sdd815

银虫 (初入文坛)

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xiaoxiao270(金币+1): 3Q 2012-02-08 20:44:03
引用回帖:
3楼: Originally posted by melody_boy at 2011-12-22 00:01:30:
额 同学你好!请问你做过这种实验没?!我没有做过想请教下,我看了些文献意思是药物从溶液往膜里的血浆里进并达到平衡,是这样的不?那按你的说法如果我的分子量是1000,那膜是不是至少是1500?!缓冲溶液的配制 ...

我们做的时候是药物从溶液里往膜里有血浆里进并达到平衡的,截留分子量是你想要截留蛋白的分子量的1/2或者1/3,缓冲液一般用磷酸氢二钠或者磷酸氢二钾,然后用磷酸调pH至7.4,再用Nacl调成等渗溶液即可
5楼2011-12-23 14:46:45
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melody_boy

木虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by sdd815 at 2011-12-23 14:46:45:
我们做的时候是药物从溶液里往膜里有血浆里进并达到平衡的,截留分子量是你想要截留蛋白的分子量的1/2或者1/3,缓冲液一般用磷酸氢二钠或者磷酸氢二钾,然后用磷酸调pH至7.4,再用Nacl调成等渗溶液即可

呵呵 想麻烦问一下 你有没有关于这实验方法的文献什么的 因为比较急,最近我看了很多,有点乱...想看篇方法详细可行性高的,如果可以,可以发我邮箱么?!renh2010@lzu.edu.cn  呵呵 万分感谢
6楼2011-12-25 23:42:57
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sgk555

木虫 (正式写手)


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引用回帖:
5楼: Originally posted by sdd815 at 2011-12-23 14:46:45:
我们做的时候是药物从溶液里往膜里有血浆里进并达到平衡的,截留分子量是你想要截留蛋白的分子量的1/2或者1/3,缓冲液一般用磷酸氢二钠或者磷酸氢二钾,然后用磷酸调pH至7.4,再用Nacl调成等渗溶液即可

请问最后一步,怎么用NaCl调成等渗呢,是直接用缓冲液配制成0.85%的溶液吗?谢谢了
7楼2011-12-26 09:12:31
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sdd815

银虫 (初入文坛)

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xiaoxiao270(金币+1): 3Q 2012-02-08 20:44:14
引用回帖:
7楼: Originally posted by sgk555 at 2011-12-26 09:12:31:
请问最后一步,怎么用NaCl调成等渗呢,是直接用缓冲液配制成0.85%的溶液吗?谢谢了

就是在最后加Nacl,使其浓度为0.9%就行了
8楼2011-12-26 10:02:20
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melody_boy

木虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by 期待 at 2011-12-22 14:28:47:
超滤管的吸附比较强,再有就是我用的30K的超滤管 直接滤不过去
透析膜也有从里边往外透析的看情况

你好 我想问下我的药物是肽类药物 分子量大概在1200左右 测的是血浆蛋白结合率,其分子量较大约68000 那么我选择其截留分子量是越小越好(eg:选5kDa)还是怎么选择呢 谢谢
9楼2012-02-08 20:24:58
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melody_boy

木虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by sdd815 at 2011-12-21 09:50:21:
膜可透过的分子量应该是你想要截留蛋白分子量的1/2或者1/3,对于这两种方法各有各的优缺点,但是对于吸附较强的药可以选用超滤法,并且超滤法比较省时

额。。打扰下 我看文献关于血浆蛋白结合率的制备标准曲线的时候基本都用缓冲液,这是为什么 直接用水配不可以么
10楼2012-02-14 11:09:34
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