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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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piaoyunokok

专家顾问

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[交流] 有关基因敲除

在一个载体上有形如A-B-A式的基因,将B插入A中,在酶切验证电泳图中,应该有那些信息啊?用什么作对照?不知道我说明白了没有,嘻嘻。
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小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
piaoyunokok(金币+1): 多谢啦 2011-12-19 21:47:21
做酶切,根据切出来的条带数目和大小判断。
找个在A和B上面都有的酶切位点,做个单酶切。
没有合适的位点的话,就做个双酶切,一个位点在A上,一个在B上。

最好不要用克隆时的位点,会有假阳性。
8楼2011-12-17 12:42:22
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果子么么茶

超级版主

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
感觉表达不是很明白 将B基因插入到载体上A基因的特定位点么? 不过对照的话 插入前的空载体酶切做对照
2楼2011-12-16 23:03:53
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piaoyunokok

主管区长

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引用回帖:
: Originally posted by 果子么么茶 at 2011-12-16 23:03:53:
感觉表达不是很明白 将B基因插入到载体上A基因的特定位点么? 不过对照的话 插入前的空载体酶切做对照

是特定的位点。而且这个位点也是通过酶切而得的。所以不能用你说的那个作对照吧?
3楼2011-12-16 23:56:32
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thetc

版主

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!


★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
西瓜(金币+1): 鼓励下 2011-12-17 12:39:53
B基因上有你所用的酶的酶切位点吗?  如果没有的话你在做融合基因的酶切后电泳的话  比较于原来未能融合的基因来说 条带会不一样,融合基因的条带会长上一些,未融合的应该是短的。
4楼2011-12-17 00:10:20
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