24小时热门版块排行榜    

查看: 3715  |  回复: 4

rhguo

铜虫 (小有名气)

[求助] 蛋白质透析后沉淀如何复溶

E coli表达的蛋白质经纯化纯度达95%,采用梯度递减的透析方法透析,到最后一个液体(PBS ,蛋白质等电点PH)的时候却发现透析袋里面都是些白色的小块沉淀。,现在我想请问大家,我能用什么方法,让这些蛋白质再溶解?可不可以用简单的稀释方法呢?如果加了其它试剂我怕会影响我后面的试验,因为我的蛋白是要用来做试剂盒的标准品的。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nmzld

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

这样的实验我没有做过,我建议你改变pH值,如果沉淀之前是逐渐减小pH值,那你现在为了使蛋白质溶解就采用逐渐增加pH值的方法,使蛋白质分子重新带电,再次溶解。
2楼2011-12-11 19:26:12
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pgwyl

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

3楼2011-12-11 19:47:28
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rhguo

铜虫 (小有名气)

送鲜花一朵
我之前是采用逐渐增加的PH,从洗脱液的4.5,递增到后面的8,发现有沉淀的再调回等电点PH,还是有沉淀啊,主要是起溶解作用的尿素透析掉了,不知道要加什么促溶剂
4楼2011-12-12 08:39:30
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bintaoD

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

该成分可能只能在酸性条件才能稳定存在,PH=8时或许已经变性了
源源不断
5楼2011-12-12 21:50:03
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 rhguo 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 5/250 2026-08-23 19:10 by lXgU0RvNTDC9
[博后之家] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 h4CP7TrQR8Lg 2026-08-22 3/150 2026-08-23 16:30 by lXgU0RvNTDC9
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 6/300 2026-08-23 14:21 by KM5EcsNQRBPn
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +3 process2012 2026-08-23 4/200 2026-08-23 12:54 by huixian257
[基金申请] 什么时候开奖? +9 CrisMessi 2026-08-18 10/500 2026-08-23 12:03 by 丶昵称占用
[基金申请] 让我中一个面上吧! +12 大萍1987 2026-08-20 14/700 2026-08-23 10:30 by wrm
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 DpSrDtM079iu 2026-08-22 5/250 2026-08-23 04:07 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 5/250 2026-08-23 03:52 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 6/300 2026-08-23 03:40 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 QTy3jDtz1uLt 2026-08-21 9/450 2026-08-23 03:04 by OEbVnUOu01ol
[教师之家] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 4/200 2026-08-22 16:52 by sunzitan
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +16 医学老男孩 2026-08-20 20/1000 2026-08-21 21:13 by Ldrop2023
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
请填处理意见