应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台» 网络生活区» 有奖问答 » 有奖问答完结子版 » 蛋白质透析后沉淀如何复溶
51/1返回列表
查看: 3771  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

rhguo

铜虫 (小有名气)

[求助] 蛋白质透析后沉淀如何复溶

E coli表达的蛋白质经纯化纯度达95%，采用梯度递减的透析方法透析，到最后一个液体（PBS ，蛋白质等电点PH）的时候却发现透析袋里面都是些白色的小块沉淀。，现在我想请问大家，我能用什么方法，让这些蛋白质再溶解？可不可以用简单的稀释方法呢？如果加了其它试剂我怕会影响我后面的试验，因为我的蛋白是要用来做试剂盒的标准品的。
回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

rhguo

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-12-11 10:40:51
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nmzld

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

这样的实验我没有做过，我建议你改变pH值，如果沉淀之前是逐渐减小pH值，那你现在为了使蛋白质溶解就采用逐渐增加pH值的方法，使蛋白质分子重新带电，再次溶解。
赞一下 回复此楼
2楼2011-12-11 19:26:12
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pgwyl

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
3楼2011-12-11 19:47:28
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rhguo

铜虫 (小有名气)
送鲜花一朵
我之前是采用逐渐增加的PH,从洗脱液的4.5，递增到后面的8，发现有沉淀的再调回等电点PH，还是有沉淀啊，主要是起溶解作用的尿素透析掉了，不知道要加什么促溶剂
赞一下 回复此楼
4楼2011-12-12 08:39:30
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bintaoD

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

该成分可能只能在酸性条件才能稳定存在，PH=8时或许已经变性了
赞一下 回复此楼
源源不断
5楼2011-12-12 21:50:03
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 rhguo 的主题更新
51/1返回列表
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 4/200 2026-09-17 03:40 by k06BKNblrGRH
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +6 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 6/300 2026-09-17 03:38 by k06BKNblrGRH
[博后之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 6/300 2026-09-17 02:26 by Tql5LQhh5rLK
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 4/200 2026-09-17 02:26 by Tql5LQhh5rLK
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +6 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 6/300 2026-09-17 02:14 by Tql5LQhh5rLK
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 5/250 2026-09-17 01:26 by Tql5LQhh5rLK
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 vZfe6xYu34yj 2026-09-14 4/200 2026-09-16 22:40 by Tql5LQhh5rLK
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +8 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 11/550 2026-09-16 18:37 by rRvxEj3zorCy
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-16 17:12 by i3KBRD19ERkG
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 4/200 2026-09-16 17:03 by i3KBRD19ERkG
[找工作] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +7 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 7/350 2026-09-16 15:12 by i3KBRD19ERkG
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 0pYnUiPDfdnk 2026-09-14 3/150 2026-09-16 06:51 by LH5NkK5Ud4bh
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 40ms4Wlo4umh 2026-09-14 3/150 2026-09-16 06:48 by LH5NkK5Ud4bh
[考研] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 40ms4Wlo4umh 2026-09-14 4/200 2026-09-16 06:36 by LH5NkK5Ud4bh
[找工作] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 3/150 2026-09-16 02:38 by DgNGHc3h5tPl
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 5/250 2026-09-15 16:59 by CgyNCDVNhGVg
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 5/250 2026-09-15 16:35 by CgyNCDVNhGVg
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 5/250 2026-09-15 14:58 by CgyNCDVNhGVg
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 4/200 2026-09-15 08:02 by C79jjtjAKjEn
[考博] 西北工业大学材料学院电化学传感与催化课题组招收2027年推免研究生、博士生、博士后 +3 马方园 2026-09-10 4/200 2026-09-14 09:29 by Chem张zz
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭