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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 新药研发 » 质量控制 » 蛋白二聚体消除
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guozejing

银虫 (小有名气)

[交流] 蛋白二聚体消除 已有1人参与

现在在做一个TNF家族的重组蛋白，分子量19KD，在纯化过程中二聚体化的程度比较高，并且难以分离，求助大家在消除蛋白二聚体或在纯化中除去二聚体的方法。谢谢。
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疯狂
1楼 2011-12-03 14:14:46
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douzihu

至尊木虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
从头开始(金币+2): 感谢参与 2011-12-04 22:31:11
纯化中去除二聚体的一般方法就是用凝胶色谱层析，优点是简洁有效填料便宜，缺点是上样量有限制。另外要是条件允许的话可以试试离子交换层析柱，不过实验条件摸索需要一定时间，我用过GE的capto adhere填料，这种填料属于复合型离子交换填料，用来推荐纯化分离单抗和二聚体的，纯化过程中单体在flow through流穿，二聚体、宿主蛋白、DNA、病毒等挂柱，最终达到分离目的。
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2楼2011-12-04 12:05:11
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guozejing

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by douzihu at 2011-12-04 12:05:11:
纯化中去除二聚体的一般方法就是用凝胶色谱层析，优点是简洁有效填料便宜，缺点是上样量有限制。另外要是条件允许的话可以试试离子交换层析柱，不过实验条件摸索需要一定时间，我用过GE的capto adhere填料，这种填 ...

谢谢。现在是在用GE的阴离子交换Q柱分离。不过我这个蛋白二聚体的形成可能是外界因素，如缓冲体系：pH、温度、离子强度或添加助溶剂等，有没有同仁做这一方面的，在二聚体的减少这一方面赐教一下。
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疯狂
3楼2011-12-04 15:49:52
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