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lishuoguo

铜虫 (小有名气)

[求助] HPLC制备套针问题 (化合物分离)

有个问题,大家帮忙解答一下:

   二次制备纯化样品,只有一个主峰,32%乙腈水56min56才出峰,因此考虑到打套针.
     在第一针走30min时打进去,这针的溶剂峰在40min左右出现,但是峰高和峰宽都比第一针大的多,并且第一针的峰在56min也没有出现,所以我推测是随后一针的溶剂峰被冲出来了,再提前时间到20min打套针,还是同样的现象.
     到底是什么原因?请大家帮帮忙解答下,不胜感激!
     之前也有打套针(样品有几个峰),没有这种现象。
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kkbyb

木虫 (著名写手)

就是,二次制备都和流动相比例是一样的溶剂了,哪来那么大溶剂峰,除非是干燥后纯乙腈溶的,那样造成局部洗脱比例增大造成随溶剂峰出来,这个几率太小了
3楼2011-11-28 14:21:01
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xiaoxiao270

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


lishuoguo(金币+10): 2011-11-28 16:57:36
jiangchunyong(金币+1): 谢谢 2011-11-28 17:35:57
被溶剂峰冲出来的可能性是很小的,你再测下你的密度,是否是你抽虑时间过长,导致溶剂中乙腈含量减少,样品峰没有出来。
另外你用的是否是示差,二次制备还有溶剂峰。如果是紫外的话换个波长,选个没有溶剂峰的波长,看看到底是否是你推测的那种现象
分离、分离
2楼2011-11-27 18:35:58
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lishuoguo

铜虫 (小有名气)

送鲜花一朵
我的样品是皂苷,只在203-210nm有吸收,流动相没有问题,因为套针(即第二针)的出峰时间是正常的56min。
    样品用的甲醇和比较少量的水溶的,但进样量只有0.15ml, 二楼所说的有一定道理,可能性是很小,但也要排除 我用流动相溶样品试一下,多谢!
    还有没有没有其他的可能呢?
4楼2011-11-28 17:08:46
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lishuoguo

铜虫 (小有名气)

我用流动相溶样品又试,发现没有上述现象了,看来是二楼所说可能性很小的那个原因啦多谢帮助!
5楼2011-11-30 13:28:43
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