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dreamshaker铜虫 (正式写手)
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lvbobo823
铁杆木虫 (正式写手)
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2楼2011-11-24 13:50:26
cjzyfx
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3楼2011-11-24 13:56:38
blackrose8089
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4楼2011-11-24 19:20:22
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
西瓜(金币+5): Good!看楼主的图似乎是做半定量,直接普通的PCR比较条带亮度呢。不过,有二聚体确实是不行的。 2011-11-24 21:31:20
dreamshaker(金币+4): 谢谢你的建议! 2011-11-25 12:36:14
西瓜(金币+5): Good!看楼主的图似乎是做半定量,直接普通的PCR比较条带亮度呢。不过,有二聚体确实是不行的。 2011-11-24 21:31:20
dreamshaker(金币+4): 谢谢你的建议! 2011-11-25 12:36:14
| 退火温度直接引用你引物软件设计上的温度,引物单上的温度不一定正确,你的片段貌似长了点,一般在150到200比较好,有引物二聚体应该是你的引物质量不是很好,如果有时间还是重新设计一对吧,这个对你后面的实验非常的重要,另外你可以现在普通上PCR试验一下,摸索合适的温度再放到定量PCR上,你说你的重复性不是很好,根据我的经验有两个原因,一个是你的基因如果是低表达的,你可以适当增加模板浓度,另外就是你在加样的时候操作不一致,不连贯,建议在加样的时候先写好一个单子,具体到每个样加多少,加的顺序是什么样的,尽量在实验的时候别临时思考。 |
5楼2011-11-24 21:04:46
dreamshaker
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6楼2011-11-24 22:01:48
dreamshaker
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7楼2011-11-24 22:06:20

8楼2011-11-25 12:12:57
西瓜
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9楼2011-11-25 16:17:40














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