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dreamshaker铜虫 (正式写手)
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[求助]
RT-PCR求助
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各位大虾： 新手上路，请指教啊。最近做RT-PCR，内参已经调的差不多了，开始扩目的条带了，但是结果却不尽人意，很是焦急啊。主要难题就是扩出的条带弱，而且有引物二聚体的存在，重复性差。我说的在详细一些，目的条带是300-500bp左右，我用的是退火温度是55度，35cycles。是不是是退火温度的原因？还有啊，引物单子上对的Tm值有两个Tm（1MNa）和Tm（0.05M Na）时的，我应该用那一个啊，如何设计引物的退火温度啊 ，请各位不吝赐教啊，将很感激啊。 再附上劣图一张，以图为参考给出些意见啊。 对于图片再做些说明，上下两个目的基因，有点marker（DL2000），5个挨紧的条带是目的条带的不同时间处理，就跑成这个样子了啊，惭愧啊，请各位给点意见。  |
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西瓜
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9楼2011-11-25 16:17:40
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