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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 克隆只长了40个菌
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索索00

铁虫 (小有名气)

[求助] 克隆只长了40个菌

我现在做克隆，连接转化后只长了40几个白斑，愁死了，我建库y要500多呢？怎么办呢？感受态的原因吗？
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1楼 2011-11-23 13:50:42
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muyuan

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
看天(金币+2): 鼓励回答 2011-11-23 17:56:42
可以做一个质粒做正对照同时做转化，如果正对照长的斑也很少，就说明感受态可能有问题，如果正对照长很多，而你的克隆很少，那可能之前的步骤如连接效率不行
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2楼2011-11-23 15:00:33
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linyingjia

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
amisking(金币+1): 鼓励新虫发帖交流。 2011-11-23 21:43:55
转化长斑太多不一定是好事
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3楼2011-11-23 19:57:46
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bingdong05

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

有目的转化子就行啊
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4楼2011-11-23 20:16:45
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bingdong05

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

看错了，楼主是要建立基因文库吗？那你要做个对比了，看下是否是感受态细胞的缘故
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5楼2011-11-23 20:17:58
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梁俊平409

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

出现这种情况的原因很多，有可能连接效果较差，不知你连接了多长时间；有可能转化后你的菌液浓度低，如果浓度低可适当多涂些；另外感受态的质量也会影响到结果。
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善待生活
6楼2011-11-23 22:16:46
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julietguo

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

会不会是做转化的时候加的质粒浓度比较低啊
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7楼2011-11-24 11:05:11
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zhoumin-09

木虫 (小有名气)

铁杆木虫

【答案】应助回帖

我觉得应该做了正对照，将未转化的感受态和转化的感受态在相同的条件下培养，涂板看转化情况，如果正对照一样情况说明感受态不行；否则就可能是转化或者连接问题了
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谨言慎行
8楼2011-11-24 11:14:24
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fancie987

禁虫 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽
9楼2011-11-24 13:52:13
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