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索索00

铁虫 (小有名气)

[求助] 克隆只长了40个菌

我现在做克隆,连接转化后只长了40几个白斑,愁死了,我建库y要500多呢?怎么办呢?感受态的原因吗?
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muyuan

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
看天(金币+2): 鼓励回答 2011-11-23 17:56:42
可以做一个质粒做正对照同时做转化,如果正对照长的斑也很少,就说明感受态可能有问题,如果正对照长很多,而你的克隆很少,那可能之前的步骤如连接效率不行
2楼2011-11-23 15:00:33
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linyingjia

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


amisking(金币+1): 鼓励新虫发帖交流。 2011-11-23 21:43:55
转化长斑太多不一定是好事
3楼2011-11-23 19:57:46
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bingdong05

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

有目的转化子就行啊
4楼2011-11-23 20:16:45
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bingdong05

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

看错了,楼主是要建立基因文库吗?那你要做个对比了,看下是否是感受态细胞的缘故
5楼2011-11-23 20:17:58
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梁俊平409

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

出现这种情况的原因很多,有可能连接效果较差,不知你连接了多长时间;有可能转化后你的菌液浓度低,如果浓度低可适当多涂些;另外感受态的质量也会影响到结果。
善待生活
6楼2011-11-23 22:16:46
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julietguo

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

会不会是做转化的时候加的质粒浓度比较低啊
7楼2011-11-24 11:05:11
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zhoumin-09

木虫 (小有名气)

铁杆木虫

【答案】应助回帖

我觉得应该做了正对照,将未转化的感受态和转化的感受态在相同的条件下培养,涂板看转化情况,如果正对照一样情况说明感受态不行;否则就可能是转化或者连接问题了
谨言慎行
8楼2011-11-24 11:14:24
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fancie987

禁虫 (初入文坛)

本帖内容被屏蔽

9楼2011-11-24 13:52:13
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