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酵母基因敲除后用回补验证吗？
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酵母基因敲除后用回补验证吗？ 用PCR介导的同源交换片段，敲除酵母基因后用不用回补基因验证啊？ 如果用，怎么回补？谢谢啦 |
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luckydog52(金币+1):谢谢参与
luckydog52(金币+2): 2012-02-21 15:10:57
luckydog52(金币+1):谢谢参与
luckydog52(金币+2): 2012-02-21 15:10:57
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通过敲除来研究基因的功能，所谓的敲除不外乎有三种情况：1）单交换插入抗性基因使原基因失活；2）抗性基因双交换替换掉原基因；3）同框缺失即完整的使原基因敲除掉。 第三种情况得到的突变株比较好但筛选工作量很大，前两种情况因为插入了抗性基因比较好筛选突变子，但是由于外源的插入了抗性基因容易引起polar effect，所以拿到突变株后要做回补实验来排除是由polar effect引起的，如果是第三种情况得到的突变株不做回补也没关系，做了会更好。 祝实验顺利！ |
luckydog522楼2011-11-19 20:02:47
3楼2011-11-19 22:40:59
4楼2011-11-20 00:01:25
5楼2012-02-21 21:47:15
6楼2012-02-21 21:51:40
7楼2013-05-24 10:20:10
8楼2013-05-28 23:11:57