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zhoujg88

木虫 (正式写手)

[求助] 求助一些酶缓冲液pH

我做的是一些生物分子的吸附,比如溶菌酶、糜蛋白酶、胰蛋白酶、牛血清白蛋白等分子,可是配制缓冲液不知道的该怎么配,因为我要在溶液中吸附24小时还能保持其分子结构,然后测定吸附前后的紫外吸光度,溶液pH不对的话这些酶应该就会不稳定失活了,这可怎么办呢?
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zhoujg88

木虫 (正式写手)

紧急求助啊!!!!!
2楼2011-11-15 15:46:40
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啊Q精神

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
zhoujg88(金币+5): 谢谢!!不过最适pH下酶不是不稳定吗?比如说胰蛋白酶在pH2-3稳定,最适pH却是在8左右怎么办呢?? 2011-11-15 16:01:05
silicare(金币+5, BioEPI+1): 2011-11-15 16:40:50
依据缓冲液对酶活性的影响可将缓冲液分为活性缓冲液、惰性缓冲液和抑制缓冲液三大类。缓冲液的离子强度也影响着酶的活性,一般选择与生理环境或体液比较接近的离子强度。

  理想的缓冲液应具备以下条件:

  (1)有足够的缓冲容量:缓冲液的pKa与最适pH越接近,缓冲容量越大。有酸碱的产生或消耗的酶促反应,对缓冲容量的要求更高。

  (2)纯度高,不含有抑制酶活性的杂质。

  (3)温度依赖性小,受温度波动pH变化小。

  (4)尽量选择活性缓冲液或惰性缓冲液。

  (5)对酶有稳定作用。
pH最好和在生理条件下一致。可以添加一些保护剂。
3楼2011-11-15 15:49:17
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