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zhoujg88木虫 (正式写手)
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[求助]
求助一些酶缓冲液pH
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| 我做的是一些生物分子的吸附，比如溶菌酶、糜蛋白酶、胰蛋白酶、牛血清白蛋白等分子，可是配制缓冲液不知道的该怎么配，因为我要在溶液中吸附24小时还能保持其分子结构，然后测定吸附前后的紫外吸光度，溶液pH不对的话这些酶应该就会不稳定失活了，这可怎么办呢？ |
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zhoujg88
木虫 (正式写手)
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2楼2011-11-15 15:46:40
啊Q精神
木虫 (小有名气)
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【答案】应助回帖
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zhoujg88(金币+5): 谢谢！！不过最适pH下酶不是不稳定吗？比如说胰蛋白酶在pH2-3稳定，最适pH却是在8左右怎么办呢？？ 2011-11-15 16:01:05
silicare(金币+5, BioEPI+1): 2011-11-15 16:40:50
zhoujg88(金币+5): 谢谢！！不过最适pH下酶不是不稳定吗？比如说胰蛋白酶在pH2-3稳定，最适pH却是在8左右怎么办呢？？ 2011-11-15 16:01:05
silicare(金币+5, BioEPI+1): 2011-11-15 16:40:50
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依据缓冲液对酶活性的影响可将缓冲液分为活性缓冲液、惰性缓冲液和抑制缓冲液三大类。缓冲液的离子强度也影响着酶的活性，一般选择与生理环境或体液比较接近的离子强度。 理想的缓冲液应具备以下条件： （1）有足够的缓冲容量：缓冲液的pKa与最适pH越接近，缓冲容量越大。有酸碱的产生或消耗的酶促反应，对缓冲容量的要求更高。 （2）纯度高，不含有抑制酶活性的杂质。 （3）温度依赖性小，受温度波动pH变化小。 （4）尽量选择活性缓冲液或惰性缓冲液。 （5）对酶有稳定作用。 pH最好和在生理条件下一致。可以添加一些保护剂。 |
3楼2011-11-15 15:49:17