| 查看: 697 | 回复: 1 | ||
小木木木虫铜虫 (小有名气)
|
[求助]
求解蛋白酶测定过程中滴加福林试剂出现沉淀，附详细过程~~~
|
|
福林法测土壤蛋白酶，在加福林试剂显色后出现白色沉淀，用力摇动沉淀消失，但会产生很多小气泡，同时颜色也不是很透明，但在680nm下还算能测得出来 下面是详细的过程： 取1.00克土壤（< 2 mm）于大试管内。加入1ml pH为8.0的Tris-HCl缓冲液。用0.5ml甲苯盖盖处理15min。再加入2ml 1％的酪素溶液，将混合物仔细摇匀，橡胶塞封口，置于37 ℃恒温箱放置24h。与此同时，作不加基质（用2毫升缓冲液代替）的对照。培养结束后，加入3ml三氯醋酸溶液，摇匀，待沉淀完全过滤，除去沉淀。吸取1ml滤液于试管内，稀释一定量后加入5ml 0.4M的Na2CO3溶液，1ml Folin- Ciocalteu试剂，定容到25ml，充分摇匀后于37℃恒温箱中培养15min，显色充分后在680nm下比色。 我觉得这句话也有一定的启发~~~~~ 要注意的是，加入福林试剂时要特别小心，试剂只在酸性pH环境中才稳定，上述提到的还原反应只有在pH10时才发生，因此，福林试剂加入到碱性的Cu2+-蛋白质溶液中时，必须立刻搅拌，以使磷钼酸-磷钨酸试剂在未被破坏之前能有效地被Cu2+-蛋白质络合物所还原。 请教前辈们 谢啦 |
回复此楼» 猜你喜欢
一志愿南农 食品工程专硕340 求调剂
已经有2人回复
-
多糖论文投稿求助
已经有2人回复
-
食品科学论文润色/翻译怎么收费?
已经有237人回复
-
339食品求调剂到B区学校
已经有0人回复
-
0955求调剂
已经有1人回复
-
0832食品调剂推荐
已经有0人回复
-
食品调剂-总分291-有中核论文导师一作、本人二作-一志愿南昌大学学硕-介绍详细
已经有12人回复
-
法国里尔大学_INRAE 2026招收食品方向CSC博士生
已经有0人回复
-
331求调剂，一志愿合工大食品工程（086003）
已经有2人回复
-
303分一志愿江南大学发酵工程学硕本科参加竞赛有实验室经历有酒厂质检员工作经历
已经有5人回复
-
331食品工程求调剂
已经有1人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 福林酚法测定蛋白酶活力出现问题了
已经有11人回复
- 关于福林酚试剂
已经有7人回复
- 求解蛋白酶测定过程中滴加碳酸钠后出现沉淀，附详细过程~~~
已经有3人回复
- 福林酚法测总酚含量 出现白色沉淀 什么原因呢
已经有11人回复
- 福林酚试剂
已经有9人回复
- 福林酚配制
已经有9人回复
- 福林酚法是否能很好评价蛋白酶降解大豆蛋白的能力
已经有5人回复
- 【求助/交流】请问做蛋白质消化用考马斯亮蓝法还是福林-酚法检测好？
已经有5人回复
- 【求助】福林酚法测总酚含量出现沉淀
已经有6人回复
小木木木虫
铜虫 (小有名气)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 247.4
- 散金: 62
- 沙发: 1
- 帖子: 168
- 在线: 86.3小时
- 虫号: 835678
- 注册: 2009-08-28
- 性别: GG
- 专业: 微生物生态学
2楼2011-11-10 16:04:27
20