| 查看: 732 | 回复: 1 | ||
小木木木虫铜虫 (小有名气)
|
[求助]
求解蛋白酶测定过程中滴加福林试剂出现沉淀，附详细过程~~~
|
|
福林法测土壤蛋白酶，在加福林试剂显色后出现白色沉淀，用力摇动沉淀消失，但会产生很多小气泡，同时颜色也不是很透明，但在680nm下还算能测得出来 下面是详细的过程： 取1.00克土壤（< 2 mm）于大试管内。加入1ml pH为8.0的Tris-HCl缓冲液。用0.5ml甲苯盖盖处理15min。再加入2ml 1％的酪素溶液，将混合物仔细摇匀，橡胶塞封口，置于37 ℃恒温箱放置24h。与此同时，作不加基质（用2毫升缓冲液代替）的对照。培养结束后，加入3ml三氯醋酸溶液，摇匀，待沉淀完全过滤，除去沉淀。吸取1ml滤液于试管内，稀释一定量后加入5ml 0.4M的Na2CO3溶液，1ml Folin- Ciocalteu试剂，定容到25ml，充分摇匀后于37℃恒温箱中培养15min，显色充分后在680nm下比色。 我觉得这句话也有一定的启发~~~~~ 要注意的是，加入福林试剂时要特别小心，试剂只在酸性pH环境中才稳定，上述提到的还原反应只有在pH10时才发生，因此，福林试剂加入到碱性的Cu2+-蛋白质溶液中时，必须立刻搅拌，以使磷钼酸-磷钨酸试剂在未被破坏之前能有效地被Cu2+-蛋白质络合物所还原。 请教前辈们 谢啦 |
回复此楼» 猜你喜欢
欢迎调剂滁州学院生物与医药专硕
已经有1人回复
-
086003调剂求助
已经有22人回复
-
食品科学论文润色/翻译怎么收费?
已经有101人回复
-
生物与医药调剂名额多，专业范围宽食品生物相关的07，08，09，10都可调
已经有15人回复
-
淮北师范大学生物医药还有11个调剂名额和资源环境还有10调剂名额，欢迎大家赶紧调剂！
已经有0人回复
-
食物营养学 电子版
已经有0人回复
-
电子科技大学（深圳）高等研究院陈明豪课题组招收推免硕士研究生
已经有19人回复
-
金铜纳米合成
已经有0人回复
-
求助1977版中国药典，非常感谢！！！
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 福林酚法测定蛋白酶活力出现问题了
已经有11人回复
- 关于福林酚试剂
已经有7人回复
- 求解蛋白酶测定过程中滴加碳酸钠后出现沉淀，附详细过程~~~
已经有3人回复
- 福林酚法测总酚含量 出现白色沉淀 什么原因呢
已经有11人回复
- 福林酚试剂
已经有9人回复
- 福林酚配制
已经有9人回复
- 福林酚法是否能很好评价蛋白酶降解大豆蛋白的能力
已经有5人回复
- 【求助/交流】请问做蛋白质消化用考马斯亮蓝法还是福林-酚法检测好？
已经有5人回复
- 【求助】福林酚法测总酚含量出现沉淀
已经有6人回复
小木木木虫
铜虫 (小有名气)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 247.4
- 散金: 62
- 沙发: 1
- 帖子: 168
- 在线: 86.3小时
- 虫号: 835678
- 注册: 2009-08-28
- 性别: GG
- 专业: 微生物生态学
2楼2011-11-10 16:04:27
20