| 查看: 3192 | 回复: 8 | ||||
| 本帖产生 1 个 PhEPI ，点击这里进行查看 | ||||
一生随袁木虫 (正式写手)
|
[求助]
谈谈大家HPLC摸条件经验
|
|||
|
想请教下 群里高手 液相摸条件的经验 ，最近发出一对未知天然产物 不过液相中两峰始终分离效果不好 ，清群中高手 给些HPLC摸条件的经验 谢谢了 [ Last edited by novus on 2011-11-3 at 12:01 ] |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 药研析疑 | 天然药化 |
» 猜你喜欢
如果此刻你正在为国基感到焦虑，不妨来听听这首《基金之外》
已经有4人回复
-
能否退出参与的面上项目解除限项
已经有18人回复
-
今日不放榜？网传国自然预计 8 月 27 日可查结果
已经有21人回复
-
估计是周四
已经有4人回复
-
我面上完蛋了
已经有9人回复
-
2026国自然函评费到账
已经有18人回复
-
建议基金发布提前给出明确的时间点
已经有15人回复
-
范进中举一文的中心思想
已经有7人回复
-
朋友圈看到的
已经有9人回复
-
让我中一个面上吧！
已经有16人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求助！hplc 摸索新化合物（新合成的me-too药物）的条件时，适宜保留时间范围？谢谢！
已经有1人回复
- 齐墩果酸与人参皂苷类如何用一个HPLC条件走出
已经有9人回复
- hplc 摸索新化合物的条件时，适宜保留时间范围？
已经有1人回复
- 求助大家怎么用HPLC测发酵液乙醇含量
已经有7人回复
- HPLC保留时间影响因素和如何增加保留时间？谢谢大家！！
已经有6人回复
- 未知化合物摸索HPLC条件
已经有7人回复
- 【求助】HPLC 检测样品一些问题，请教大家！
已经有8人回复
- 【求助】准备用反相硅胶柱层析分离纯化，之前用HPLC怎么摸条件啊？
已经有7人回复
- 【交流】HPLC相同条件下，为何我们检测不出主峰杂质？
已经有11人回复
- 【求助】HPLC 条件摸索 很苦恼
已经有8人回复
- 【资源】经验：反相HPLC柱子的清洁和再生
已经有22人回复
- 【求助】薄层摸条件的经验
已经有14人回复
- 【讨论】对标准品和样品进行HPLC分析时的色谱条件需要一致吗？
已经有11人回复
kkbyb
木虫 (著名写手)
- 应助: 166 (高中生)
- 金币: 3754.5
- 散金: 57
- 红花: 12
- 帖子: 1608
- 在线: 223.3小时
- 虫号: 444288
- 注册: 2007-10-27
- 性别: GG
- 专业: 药物分析
2楼2011-11-03 16:02:55
|
本帖内容被屏蔽 |
3楼2011-11-05 15:48:19
gldgyz
铜虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 117.8
- 散金: 10
- 帖子: 78
- 在线: 110小时
- 虫号: 947237
- 注册: 2010-01-23
- 性别: GG
- 专业: 中药学其他科学问题
4楼2012-02-17 10:55:52
5楼2012-03-21 13:36:19
tianming887
金虫 (正式写手)
- 应助: 5 (幼儿园)
- 金币: 1176.6
- 散金: 100
- 红花: 2
- 帖子: 585
- 在线: 276小时
- 虫号: 529214
- 注册: 2008-03-20
- 专业: 药物化学
6楼2012-03-21 16:28:24
大眼睛韩
木虫 (小有名气)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 1690.3
- 散金: 14
- 红花: 2
- 帖子: 197
- 在线: 137.6小时
- 虫号: 1506214
- 注册: 2011-11-23
- 性别: MM
- 专业: 中药学其他科学问题
7楼2012-03-22 15:28:41
8楼2012-03-22 19:15:42
痴夷子皮
版主 (文坛精英)
老痞
- PhEPI: 10
- 应助: 2016 (讲师)
- 贵宾: 5.368
- 金币: 54487.3
- 散金: 41688
- 红花: 303
- 沙发: 1206
- 帖子: 32611
- 在线: 4303.7小时
- 虫号: 674536
- 注册: 2008-12-14
- 性别: GG
- 专业: 无神论
- 管辖: 人文社科
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
qinhy: PhEPI+1, 不错的总结~ 2012-03-29 08:35:05
qinhy: PhEPI+1, 不错的总结~ 2012-03-29 08:35:05
|
1、如果能有相关的文献或资料参考，估计会相对比较简单。 2、条件摸索 a、样品性质 主要了解化合物的结构、分子量、pKa、UV、样品浓度范围、溶解度等。 b、色谱柱选择 样品能溶于水-有机混合液的大多数样品（特别是中性或非离子化合物），可以选择反相HPLC，流动相选择水-有机溶剂，色谱柱可以选择C18、C8、TMS、苯基、氰基。一般C18用得比较多。 样品为离子或可电离的化合物（特别是碱性或阳离子样品），可以选择离子对HPLC，流动相选择水-有机溶剂，控制pH的缓冲液和离子对试剂，色谱柱可选择C18、C8、氰基。一般C18用得比较多。 若反相或离子对HPLC无效时，或样品不溶于水-有机混合液。可以选择正相HPLC体系。流动相选择有机溶剂混合液，色谱柱选择氰基、氨基、硅胶、二醇基。 c、初始分离条件（相对较好的首要选择、等度） 色谱柱：150X4.6mm、5um、固定相为C18或C8 流动相：缓冲液-乙腈，缓冲液可选择纯水或缓冲盐（浓度10~30mM）（若中性样品，无需使用缓冲盐）并用酸碱调控pH（如果pH小于2.5，建议选择pH稳定的色谱柱，避免固定相流失），乙腈起始比例可以选择80~100%。 离子对等添加剂，开始时请不要使用。流速1.0~2.0ml/min，柱温35~40℃。 样品：（最好以流动相溶解样品）进样体积小于25uL，进样量小于100ug。 d、液相方法基本目标 分离度：R大于1.5 分离时间：5~10min较理想 定量：RSD小于2% 压力：基本要求小于200bar（20M） 针对基本目标，按实际情况进行调整，譬如流动相实际组分比例，缓冲盐浓度及pH，柱温，梯度等。 |
9楼2012-03-24 13:08:06
