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ymmno6

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] 目标基因扩增

一个月以前还能从很多小麦叶片基因组DNA中扩增到大量的目标基因,现在再扩增只有阳性对照有条带,别的扩增不到了?请问那位知道怎么回事?谢谢
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peace12039088

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2): 鼓励发帖交流! 2011-10-27 20:47:37
1,DNA可能降解
2,PCR时尝试降低一下退火温度。有时候PCR很诡异。
2楼2011-10-27 16:25:35
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三目

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

基因组DNA片段太大讲解掉了吧?你一个月前提取的基因组DNA存于几度冰箱的?
3楼2011-10-27 17:05:03
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

【答案】应助回帖

问题如此简略,让我们这些应助者情何以堪哪。。。。
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
4楼2011-10-27 21:34:16
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xiaoche

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


wanhscn(金币+1): 鼓励应助! 2011-10-28 17:59:56
呵呵,PCR永远都是这样的,你试一下换换别的引物,看看是否是DNA的问题,如果DNA没有问题的话,那就换一下酶吧,这个谁也说不准,只能不断的换东西。
5楼2011-10-27 22:10:16
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ymmno6

铁杆木虫 (正式写手)

基因组DNA放在4度冰箱,以前的DNA放一年也没问题,还是能够扩增出来的,引物、酶都是新的,体系与上次的一样,但是就是没有条带了?
6楼2011-10-28 07:17:43
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lloveyr

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

可能是DNA 降解了
7楼2011-10-28 14:14:50
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geniusrkx

铁杆木虫 (小有名气)

才虫

【答案】应助回帖

换换手试试 不同的人做  说不定会有结果不同
我活着,我精彩
8楼2011-10-29 12:24:31
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liyuntao023

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
西瓜(金币+2): Good 2011-11-09 12:29:49
降一下退火温度,或者加点PCR增强的东西,如DMSO,加大Mg的用量;或者几种措施同时用,我也碰到过类似的的情况,后来采用这些方法折腾了一段时间有P出来了
9楼2011-11-08 22:32:41
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liaotiantian

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

把试剂都换掉,如果还是不行,应该就是模板出问题了。
10楼2011-11-09 09:17:34
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