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chaijudi

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
amisking(金币+5, MolEPI+1): 鼓励应助! 2011-10-27 20:48:31
donnafeng(金币+40): 谢谢 实验室只有superdex75了 可以用来脱盐吗 蛋白17kd左右 疏水聚合可以加表面活性剂一类的减少吗 2011-10-28 10:11:57
donnafeng(金币+10): 2011-10-28 22:24:13
1.可能是等电点沉淀吗?看见有人说要偏离等电点2-3个单位 是这样的吗 改成ph8.5的tris-hcl缓冲液会不会好点呢
蛋白质带电荷的基团较多,pH酯有点影响,不会这么大吧!改变pH估计会有点效果,不会太大!

2.有可能是聚合沉淀吗  文献报道这种蛋白可能是二聚体或者四聚体 会不会在透析的过程中2、4、6、8聚体一类的都可能形成啊   如果是应该怎么处理
你看文献有研究和你类似的蛋白质没,有的话他们那些是否有聚合性质呢,。如果同类蛋白质多具有聚合性质,那估计你的蛋白质也具有这一性质。那可以考虑两个方面,一是加入电解质(也就是无机盐)减小聚合趋势(因电荷作用引起的);另一个是疏水性作用引起的聚合,这个不太好办了!

3.不用透析用柱层析来脱盐行吗  具体用什么柱子 什么条件来脱盐  看见有人用g-25来做脱盐柱  是不是不管多大的蛋白都可以用g-25脱盐啊   脱盐柱的原理是什么啊
脱盐柱也可以,我用过G-25,原理就是无机小分子可以进入树脂的小孔内,在柱子经过的路径长,二蛋白质大分子则不能进入树脂内部,经由树脂间隙流出,由于两类物质所经历的途径长短不同,实现分离!

你观察到底聚合估计是由于溶液中的盐分减少,蛋白质间带不同电荷的基团相互吸引引起蛋白质分子沉降。
3楼2011-10-27 14:23:08
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