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yesucao

木虫 (正式写手)


[交流] 绿色荧光的观察

本人目前在做绿色荧光蛋白标记,已经构建好载体,转DH5a,也电转了自己的枯草芽孢杆菌,今天用荧光正置显微镜观察绿色荧光的时候,发现不管什么转化或者没转化的菌种只要放上去都有绿色荧光出现,DH5a、枯草芽孢杆菌这些明知是不会出现荧光的也出现了,,而且荧光也只能是在低倍数上观察,倍数高了还看不到了,不知道该怎么办才好啊,还请各位帮我分析一下。
实验室的荧光正置显微镜型号为 ECLIPSEV80i
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yesucao

木虫 (正式写手)


引用回帖:
3楼: Originally posted by 三目 at 2011-10-25 21:38:02:
你应该是没有去除背景吧,荧光标记的地方一般是高亮的

去除背景??怎么去除呢,荧光显微镜观察的时候用的是彩色拍照的,与电脑上面的一个软件相连接,是直接在电脑上操作吗??目前实验室的那台荧光显微镜没几个人使用,一些不常用的功能有些我们还不知道
22楼2011-10-26 09:36:38
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★ ★ ★
yesucao(金币+1):谢谢参与
wanhscn(金币+2): 同意!鼓励交流! 2011-10-26 11:08:11
可能是背景吧。你看看没有菌的地方是不是也有荧光?
2楼2011-10-25 21:32:23
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三目

木虫 (小有名气)


★ ★
yesucao(金币+1):谢谢参与
wanhscn(金币+1): 鼓励交流 2011-10-26 11:12:46
你应该是没有去除背景吧,荧光标记的地方一般是高亮的
3楼2011-10-25 21:38:02
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tianchongmy

铁杆木虫 (著名写手)


★ ★ ★
yesucao(金币+1):谢谢参与
wanhscn(金币+2): 鼓励应助! 2011-10-26 11:08:21
肯定是背景,楼主你确定可以在DH5a里表达吗,它的表达量会很低的吧,建议转化一个高效表达的菌看看,可能亮度就更高了
6楼2011-10-25 23:51:45
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2011-10-26 08:06   回复  
yesucao(金币+1):谢谢参与
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