应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 连接酶切问题
51/1返回列表
查看: 2480  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

上官譞

新虫 (初入文坛)

[求助] 连接酶切问题

我用SwaⅠ酶切载体，然后连接GFP，酶切连接一起做，25度一小时，可是总是连不上，有做过的帮分析一下吗，谢谢
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-10-16 19:14:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

luoyang87

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by 上官譞 at 2011-10-17 15:08:04:
可以的，应经做过了，不用内切酶的buffer,SwaⅠ酶有个特点，连接成功后，不会在原来连接的位点再切开，所以不会担心连接成功再被切开。。。

你做的太高端了，没接触过，我觉得既然没发重现之前的结果，不妨稳妥点，酶切连接分开进行
赞一下 回复此楼
8楼2011-10-17 15:12:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

linyingjia

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
看天(金币+1): 鼓励交流 2011-10-17 11:19:02
位点选的对吗   酶切、连接反应条件对吗    东西没过期？
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-10-16 19:37:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

怎么都行

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
看天(金币+1): 鼓励 2011-10-17 11:18:53
酶切连接一起做是什么意思，两步同时进行？
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2011-10-17 02:01:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

上官譞

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by linyingjia at 2011-10-16 19:37:42:
位点选的对吗   酶切、连接反应条件对吗    东西没过期？

平头末端连接，和位点选择相关吗，我现在就是有点怀疑连接的条件，以前有人做过，成功了，但是我自己做就是连不上，已经做了很多次，根据电泳图看，似乎是载体连在一起了，我也是刚刚开始做实验。。。
赞一下 回复此楼
4楼2011-10-17 08:05:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭