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wendaojue

铜虫 (著名写手)

[求助] 有什么方法能敲除一个基因中间的几个碱基,再克隆到载体上

想搞一个突变,不知道怎么做,谢谢了!
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nanamaka

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

PCR突变,设计引物时把相应位置突变,突变位置不要设计在5'或3',最好在中间位置,用高保真的KOD酶扩增,两轮反应就可以得到突变了。
人生若只如初见
6楼2013-07-25 22:43:35
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红多多

木虫 (正式写手)

版筑饭牛的日子

【答案】应助回帖

呵呵 在引物上面设计图片位点 用PCR的方法就可以了
可以用QQ找我……
2楼2011-10-11 11:33:43
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yemuren

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

楼主可参照《分子克隆实验指南》第三版 下册P1095页方案三,或者用 Quickchange II site-Directed Mutagenesis kit做,不难。
我的专长叫做流浪,所以我就做了流氓~
3楼2011-10-11 14:17:15
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临风7071

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by yemuren at 2011-10-11 14:17:15:
楼主可参照《分子克隆实验指南》第三版 下册P1095页方案三,或者用 Quickchange II site-Directed Mutagenesis kit做,不难。

重叠pcr可以,你可以看一下的
4楼2011-10-11 14:24:42
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