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hjhjhj6

金虫 (小有名气)

[求助] 关于鱼卵石蜡切片的问题

做的鱼胚胎的石蜡切片,可能由于内部的卵黄物质比较特殊,包埋后很脆,切片染色后结果不理想,内部红色卵黄物质容易散落。有什么办法能使内容物不太容易跑出来呢?整个过程我没有弄破卵膜,各级酒精脱水都是1小时,用水杨酸甲酯透明一夜,最后透蜡3小时,HE染色。
以下为拍摄的照片,一张是不太好的,一张还可以。请高手们支支招~谢谢。

较好的



较差的
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HakunaMatata~
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白熬乐之

木虫 (正式写手)


jhu132llh(金币+1): good,感谢应助 2011-10-16 09:07:12
卵黄问题确实是石蜡切片的难题,冰冻切片试试?
2楼2011-10-15 13:10:31
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kiky00009

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
jhu132llh(金币+3, APEPI+1): good,鼓励新虫积极应助 2011-10-18 10:28:34
hjhjhj6(金币+5): 斑马鱼,这样的话。。我盐酸那一步忽略了,只是用重铬酸钾浓硫酸溶液洗过,我下次试试 2011-10-20 21:37:39
lz你这是什么鱼啊,一般我们做性腺切片用波恩氏液固定后效果都很好,还有就是载玻片要先先浸在盐酸里最少24小时,然后涂甘油蛋白,如果新鲜样本很不容易掉的
waka waka
3楼2011-10-17 22:39:05
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hjhjhj6

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by kiky00009 at 2011-10-17 22:39:05:
lz你这是什么鱼啊,一般我们做性腺切片用波恩氏液固定后效果都很好,还有就是载玻片要先先浸在盐酸里最少24小时,然后涂甘油蛋白,如果新鲜样本很不容易掉的

对了,本身样品确实也不够新鲜,多聚甲醛,冰箱4度放了2个月。
HakunaMatata~
4楼2011-10-20 21:38:42
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kiky00009

铜虫 (初入文坛)

★ ★ ★ ★
jhu132llh(金币+2): good,鼓励积极应助 2011-10-21 16:25:27
jhu132llh(金币+2): good,鼓励积极应助 2011-10-21 16:25:29
最好还是现做现切,要不然很多组织都融了
waka waka
5楼2011-10-21 15:26:19
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xiajm

铁虫 (小有名气)


引用回帖:
2楼: Originally posted by 白熬乐之 at 2011-10-15 13:10:31:
卵黄问题确实是石蜡切片的难题,冰冻切片试试?

请问,蛋白甘油难道不会被染成红色吗?您是如何解决?谢谢了
6楼2012-02-12 18:27:26
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xiajm

铁虫 (小有名气)


引用回帖:
3楼: Originally posted by kiky00009 at 2011-10-17 22:39:05:
lz你这是什么鱼啊,一般我们做性腺切片用波恩氏液固定后效果都很好,还有就是载玻片要先先浸在盐酸里最少24小时,然后涂甘油蛋白,如果新鲜样本很不容易掉的

请问,蛋白甘油难道不会被染成红色吗?您是如何解决?谢谢了
7楼2012-02-12 18:28:00
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hjhjhj6

金虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by xiajm at 2012-02-12 18:28:00:
请问,蛋白甘油难道不会被染成红色吗?您是如何解决?谢谢了

蛋白甘油只是粘片剂,涂多了会使片子染成红色,因此要涂适量,基本上粘一小滴涂匀就够了
HakunaMatata~
8楼2012-02-18 19:25:43
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