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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于T7－Tag？
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cpumxl

金虫 (小有名气)

[求助] 关于T7－Tag？ 已有1人参与

我最近在用pET28a做构建表达蛋白，采用N段的His-Tag进行后面的纯化，而选用的酶切位点是BamH1和Xhol1（后面带了终止密码子）,因为用的是BamH1酶切位点，而没有采用前面的Nde1进行酶切，会导致表达产物会带上T7－Tag，不知道这样做影响大不大，我该怎么办，望指点，谢谢！
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1楼 2011-10-09 13:20:35
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liuyuexinfei

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

cpumxl(金币+2): 我想拿这个蛋白做抗原，制备单抗，不知道影响会怎么？ 2011-10-10 23:03:05
应该没事，我们经常这样做的，但关键看你的蛋白，如果不行就要从新设计引物了
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我选择，我喜欢；我喜欢我的选择。
6楼2011-10-09 19:21:26
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doublehelix

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
西瓜(金币+1): 有经验！ 2011-10-10 17:19:07
cpumxl(金币+2): 我想拿这个蛋白做抗原，制备单抗，不知道影响会怎么？ 2011-10-10 23:02:13
影响一般不大..这也与你所表达的蛋白有关，国外很多都这样做 ，我们实验室也是如此。如果实在不放心，那就重设一下上游引物吧
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2楼2011-10-09 13:31:50
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yuxia82012

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

没什么影响，直接做就好了
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在等待中涅槃重生
3楼2011-10-09 13:33:08
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asznpb

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

应该没啥事，直接做就是了……
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显微镜下的世界很精彩！
4楼2011-10-09 13:34:06
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