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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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fannyzehong

银虫 (初入文坛)

[求助] 这样的质粒可用吗?

新手提取质粒,用的是碱裂解法,不知道这样的质粒能用吗?提的是DH5a的质粒,插入了我的目的片段。怎样才能提取出质量更好的质粒?谢谢!
因为是新人,金币有限,请谅解!

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fannyzehong

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by wzqno at 2011-10-08 19:21:30:
总体来说,抽出来的质粒三条带很正常,没啥好担心的,用内切酶切一下就知道你的目的基因有没有连上了,不过你确定这是同一种质粒??怎么大小不一致啊??还有你的DNA marker是两万的还是两千的??

目的条带不一样。一个泳道是一种质粒。marKer是8k的。
7楼2011-10-09 09:59:00
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rhy1027

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

adslye(BioEPI+1): 鼓励交流~ 2011-10-08 19:16:52
fannyzehong(金币+4): 2011-10-09 09:57:06
从图上看你抽出来的质粒是正常的。一般抽出来的质粒图谱就不会是简单的一条比较sharp的带,插入目的基因的质粒会有三种形态,一种是双螺旋的,一种是环状的,还有线性的。至于鉴定,就需要你做酶切,或者PCR的,不能看着图谱不漂亮就说质粒质量不好,DH5a扩增质粒一般都没有问题的。
2楼2011-10-08 16:49:10
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
adslye(金币+2): 鼓励交流~祝顺利! 2011-10-08 19:17:03
fannyzehong(金币+1): 2011-10-10 17:09:14
质粒出三条带也算正常,线性的,双螺旋,以及超螺旋结构会使质粒出现多条带,要确认是不是你所需要的质粒最好酶切一下。
hehe
3楼2011-10-08 17:41:59
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wzqno

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

总体来说,抽出来的质粒三条带很正常,没啥好担心的,用内切酶切一下就知道你的目的基因有没有连上了,不过你确定这是同一种质粒??怎么大小不一致啊??还有你的DNA marker是两万的还是两千的??
4楼2011-10-08 19:21:30
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