| 查看: 783 | 回复: 1 | |||||
[交流]
普通PCR基因组出现非特异性扩增带解决对策 已有1人参与
|
|
PCR扩增后出现的条带与预计的大小不一致，或大或小，或者同时出现特异性扩增带与非特异性扩增带。 1 原因 一是引物与靶序列不完全互补、或引物聚合形成二聚体。 二是Mg2+离子浓度过高、 退火温度过低， 及PCR循环次数过多有关。 其次是酶的质和量，往往一些来源的酶易出现非特异条带而另一来源的酶则不出现， 酶量过多有时也会出现非特异性扩增。 2 对策 ①必要时重新设计引物。 ②减低酶量或调换另一来源的酶。 ③降低引物量，适当增加模板量，减少循环次数。 ④适当提高退火温度或采用二温度点法(93℃变性，65℃左右退火与延伸)。 生物一一四 |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 收藏 | 实验经验 |
» 猜你喜欢
天津大学招2026.09的博士生，欢迎大家推荐交流（博导是本人）
已经有11人回复
-
表哥与省会女结婚，父母去帮带孩子被省会女气回家生重病了
已经有9人回复
-
AI 太可怕了，写基金时，提出想法，直接生成的文字比自己想得深远，还有科学性
已经有10人回复
-
同年申请2项不同项目，第1个项目里不写第2个项目的信息，可以吗
已经有10人回复
-
依托企业入选了国家启明计划青年人才。有无高校可以引进的。
已经有11人回复
-
依托企业入选了国家启明计划青年人才。有无高校可以引进的。
已经有11人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- PCR非特异性扩增问题解决
已经有70人回复
- PCR产生非特异性带
已经有11人回复
- 环状基因组的PCR
已经有4人回复
- 基因组中长片段PCR应该注意的几个问题
已经有14人回复
- 连接后转化子PCR出现非特异性的条带
已经有10人回复
- 求助 土壤基因组 PCR 扩增问题
已经有30人回复
- 连接转化后菌落PCR验证出现非特异性扩增
已经有5人回复
- 【求助/交流】有引物二聚体、非特异性扩增带是怎么回事？
已经有10人回复
- 【求助/交流】PCR后没有目的条带，有非特异性条带，求解决办法？？
已经有20人回复
addictedfish
铁虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 28.5
- 散金: 10
- 帖子: 23
- 在线: 50.9小时
- 虫号: 1379236
- 注册: 2011-08-25
- 专业: 作物分子育种
2楼2011-10-23 23:35:53