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双向电泳,蛋白定量测定用方法的讨论
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hrjxx
新虫
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[交流]
双向电泳,蛋白定量测定用方法的讨论
伯乐的推荐braford法,这个原理是根据考马斯亮蓝结合蛋白形成的复合物在595nm处,形成最高吸收值,可是GE的说明里说,凡是含有chaps,dtt,载体两性电解质等溶液,都不能用以考马斯亮蓝结合蛋白为原理的蛋白定量测定,而双向的样品溶液里,确实含有这几个东西,这个你们都是怎么处理的啊 ??请大家给予指教啊 ?????
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1楼
2011-09-20 10:27:10
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hrjxx
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虫号: 1248638
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4楼
:
Originally posted by
hf2016
at 2011-09-21 09:12:22:
我们也是用的GE 的系统,的确是有一定影响的,这个我曾经用新制的水化液与pbs比较过,相差挺大的,当时工程师来的时候还是用的bradford方法,如果都是采用的相同方法,一定程度上还是可以抵消误差的我觉得,如果还 ...
bca方法好像更为不妥啊,里面的DTT是还原剂可以还原二价铜离子为一价,增加吸光度啊
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5楼
2011-09-21 11:45:40
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★
hrjxx(金币
+1
):谢谢参与
那你就换个蛋白测定的方法好了哦!
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2楼
2011-09-20 10:52:43
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chaijudi
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★ ★
hrjxx(金币
+1
):谢谢参与
西瓜(金币+1): good 2011-09-20 18:02:21
可以用紫外吸收测定 280nm吸收 确定浓度!
不含发光氨基酸的除外了!
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3楼
2011-09-20 17:22:23
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hf2016
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★ ★ ★ ★
hrjxx(金币
+1
):谢谢参与
dhd997(金币+3): good 2011-09-21 12:26:26
我们也是用的GE 的系统,的确是有一定影响的,这个我曾经用新制的水化液与pbs比较过,相差挺大的,当时工程师来的时候还是用的bradford方法,如果都是采用的相同方法,一定程度上还是可以抵消误差的我觉得,如果还是觉得不保险的话,换个方法也成啊。好多事用的BCA方法定量的
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4楼
2011-09-21 09:12:22
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