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sacB基因验证出问题了 大家懂的帮帮忙啊
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xmc201103
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求助
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sacB基因验证出问题了 大家懂的帮帮忙啊
已有2人参与
我是小硕,弱弱的问一下:我有个带sacB基因的载体,是从别的实验室要来的,需要验证sacB的功能,理论上空载体应该是蔗糖致死的,只有插入片段后才能长菌。我把人家寄来的空载体的菌液用LB摇起来,然后涂在含抗生素和5%蔗糖的LB板上,结果全是菌。不知道哪有问题,是不是摇菌的时候也要加蔗糖?还是原本的菌液有问题?很着急呀,希望大家帮帮我~谢谢了!
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1楼
2011-09-14 10:03:26
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jinying1123
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【答案】应助回帖
我也出现了这样的问题,我的是把原来的质粒双酶切转化,构建的新质粒,但是我这个新质粒在5%蔗糖的平板上生长了,新质粒多酶切验证,片段大小都正确,但是就是这个sacB没表现出功能,你后来是怎么解决的?我是菌悬液涂板的,不是点中,和这个有关系么
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5楼
2014-09-12 09:01:51
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wanhscn
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专业: 植物遗传学
【答案】应助回帖
人家的菌寄来后你有没有划单克隆?万一不纯或者在寄的过程中出问题怎么办!
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2楼
2011-09-14 11:20:27
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xmc201103
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专业: 植物遗传学
没挑单克隆,这个实验比较急,所以就直接沾了一下人家的菌液在LBK里,就摇了。
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3楼
2011-09-14 17:36:29
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xmc201103
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wanhscn
at 2011-09-14 11:20:27:
人家的菌寄来后你有没有划单克隆?万一不纯或者在寄的过程中出问题怎么办!
没挑单克隆,这个实验比较急,所以就直接沾了一下人家的菌液在LBK里,就摇了。
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4楼
2011-09-14 17:37:52
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