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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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xiuwei001

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] 长序列(6.5k bp)基因的克隆

请问长序列(大约6500个bp)的基因如何克隆?采用什么试剂盒?

目前已知这个基因在烟草天蛾(一种虫子)的全序列,目的想克隆蚜虫里面的序列

[ Last edited by xiuwei001 on 2011-9-4 at 15:57 ]
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瓶儿花

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
西瓜(金币+2): 是啊,还是分成2到3段克隆比较好! 2011-09-04 19:00:47
xiuwei001(金币+2): 谢谢 2011-09-04 19:18:33
扩增的序列有点长,建议分段扩增,减少因PCR扩增而引起的碱基突变的问题。
3楼2011-09-04 16:39:36
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


西瓜(金币+1): 鼓励交流 2011-09-04 19:00:09
xiuwei001(金币+3): 谢谢 2011-09-04 19:18:26
长片段克隆建议用Takara的高保真酶或是其他公司的,楼主可以向技术咨询一下,进行比较!另外,豌豆蚜虫的全基因组序列公布,不知楼主使用的是哪一种,楼主可否根据公布的序列设计引物来扩增!
jiayoubashaonian
2楼2011-09-04 16:29:52
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quiller2000

木虫 (著名写手)

★ ★
dhd997(金币+2): 好建议 2011-09-05 07:47:25
一般的高保真的如KOD系列的应该都可以吧,如果你不放心的话,可以做搭桥,想搞多长久搞多长,呵呵!
致良知
4楼2011-09-05 00:29:03
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