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小酒窝7988

银虫 (小有名气)

[求助] 色谱柱污染或坍塌问题

我之前做的实验一直都好好的,如图1所示,就在有一天早上做也是和1一样好好的,后来不知道怎么就出现拖尾了,如图2所示,再后来就出现肩峰如图3所示,这到底是我的柱子被污染了  还是坍塌了???那应该怎么做(我用甲醇,PH=2.9的醋酸以0.5ml/min的流速都各冲洗过1小时还是没用),也不敢反冲(柱子是XBP  C18(L))




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小酒窝7988

银虫 (小有名气)

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2楼: Originally posted by zuhongbo at 2011-09-02 19:05:51:
你测的是中性的还是其他的呀,若是酸性的物质加点酸,或者加点缓冲盐可以消除拖尾,可能是你的流动相组成在这个过程中发生了变化,要不然配瓶新的流动相试试,除非你用碱性很强的流动相,柱子应该不至于那么快就坏的

我试过加酸还是一样的出现肩峰,现在更加严重了,我以前一直用甲醇和水做流动相的,分离的物质是苯胺类化合物
3楼2011-09-02 19:31:50
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小酒窝7988

银虫 (小有名气)

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5楼: Originally posted by a13738053065 at 2011-09-02 23:14:15:
用90ACN和10%纯水冲洗过夜,次日实验不要加酸。
样品溶剂纯甲醇或者纯乙腈
如若还是不行,则95ACN饱和,两端封口,存放一周。
类似问题碰到过N次了,基本都能如上解决

什么是ACN    这样可以解决色谱柱塌陷和堵塞?为什么?
8楼2011-09-03 13:19:08
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小酒窝7988

银虫 (小有名气)

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9楼: Originally posted by rabit5522 at 2011-09-03 21:19:22:
是你的待分析物质,在你的流动相中有析出,你可以关注下你的柱压,如果柱压有上升的话,基本可以断定就是你的物质在流动相中析出了!

我的柱压确实从原来的17MPa变到了21MPa,但是我的样品也是用流动相配置的,放很久也没看见样品瓶里面有样品析出啊???哪还会是样品被析出了吗?
15楼2011-09-06 08:59:44
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