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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 木聚糖酶酶活
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897108861

木虫 (著名写手)

[交流] 木聚糖酶酶活

有测过木聚糖酶酶活的GG/MM没？本人用DNS法测的，可是对照组（使酶失活）与DNS也显色，且颜色很深。是不是用的木聚糖底物不行啊？大伙都是咋测得木聚糖酶活啊
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1楼 2011-08-30 22:28:45
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
897108861(金币+1): 谢谢 2011-09-01 21:26:13
引用回帖:
1楼: Originally posted by 897108861 at 2011-08-30 22:28:45:
有测过木聚糖酶酶活的GG/MM没？本人用DNS法测的，可是对照组（使酶失活）与DNS也显色，且颜色很深。是不是用的木聚糖底物不行啊？大伙都是咋测得木聚糖酶活啊

我做的对照为
                                底物液（缓冲液）    酶液           水
对照一                        1 mL                    ---              0.5mL
对照二                                                   0.5mL        1.0 mL

反应液                        1 mL                    0.5mL         ----


反应结束后DNS法显色。。。。用水做空白调零。。


对照一没有酶液，但底物木聚糖会有些颜色。
对照二 一般只有甚小的吸光值，若吸光值偏高，说明酶液里有木糖或葡萄糖成分。

反应液测出的吸光值，一般要减去对照一和二的吸光值，才是酶活产生的吸光值。

所以，你的所谓对照组，有很深的颜色，一个可能是酶没有完全失活，一个可能是酶液含有单糖造成DNS吸光值升高。
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2楼2011-08-31 22:33:59
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)
重复了。编辑掉。

楼主只有做了对照一和对照二，才能找到原因。

[ Last edited by HarveyWang on 2011-8-31 at 22:37 ]
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3楼2011-08-31 22:34:40
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wangyangliut

银虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
你的底物已经被降解了，需要重新配底物
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4楼2011-09-01 16:44:54
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wangyangliut

银虫 (正式写手)
你重新配个底物再试，如果还是显色了，说明你样品里有木糖
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897108861
5楼2011-09-01 16:46:32
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897108861

木虫 (著名写手)
谢谢各位，找到原因了，是使用的木聚糖中含有大量的木糖。大家一般是使用什么品牌的木聚糖作为底物啊？我用的是：燕麦木聚糖(xylan from  oat  spelt )，Sigma （x0627 )公司产品，这个不行啊
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6楼2011-09-01 21:33:55
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897108861

木虫 (著名写手)
送鲜花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by wangyangliut at 2011-09-01 16:46:32:
你重新配个底物再试，如果还是显色了，说明你样品里有木糖

仁兄，使用的什么牌子的木聚糖啊？
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7楼2011-09-01 21:35:49
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wangyangliut

银虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by 897108861 at 2011-09-01 21:35:49:
仁兄，使用的什么牌子的木聚糖啊？

哈哈，和你的一样，我做的时候效果挺好的。另外，我是MM
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8楼2011-09-02 10:14:24
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莫，回首

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
哎，我和你一样，害我白做那么多批。以后现配现用吧
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9楼2011-11-14 13:44:40
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839967781

木虫 (职业作家)
897108861(金币+1): 2011-11-14 20:07:20
你的底物已经被降解了，需要重新配底物
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10楼2011-11-14 13:55:13
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897108861

木虫 (著名写手)
我的木聚糖底物是现配现用的
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11楼2011-11-14 20:08:08
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tsq0126

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3921716楼: Originally posted by 897108861 at 2011-11-14 20:08:08
我的木聚糖底物是现配现用的

大虾，指点一下迷津，你用的是什么牌子的木聚糖呀，急急急。
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12楼2012-11-05 15:55:23
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tsq0126

金虫 (小有名气)
引用回帖:
936331楼: Originally posted by 897108861 at 2011-09-01 21:33:55
谢谢各位，找到原因了，是使用的木聚糖中含有大量的木糖。大家一般是使用什么品牌的木聚糖作为底物啊？我用的是：燕麦木聚糖(xylan from  oat  spelt )，Sigma （x0627 )公司产品，这个不行啊

大虾，指点一下迷津，你用的是什么牌子的木聚糖呀，急急急。
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13楼2012-11-05 15:55:45
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897108861

木虫 (著名写手)
引用回帖:
4730978楼: Originally posted by tsq0126 at 2012-11-05 15:55:45
大虾，指点一下迷津，你用的是什么牌子的木聚糖呀，急急急。...

一般用的sigma公司的木聚糖，不过型号有好几种 ，我目前用的是X4252-10G,之前用的是X0627的；你根据自己的实验选择合适的撤
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14楼2012-11-05 21:58:20
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余欢梦寒

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
楼主，问请你后来怎么解决的？我现在用的也有很深的颜色
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15楼2014-07-28 17:11:11
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