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897108861

木虫 (著名写手)

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[交流] 木聚糖酶酶活

有测过木聚糖酶酶活的GG/MM没？本人用DNS法测的，可是对照组（使酶失活）与DNS也显色，且颜色很深。是不是用的木聚糖底物不行啊？大伙都是咋测得木聚糖酶活啊

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1楼 2011-08-30 22:28:45

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tsq0126

金虫 (小有名气)

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引用回帖:

936331楼: Originally posted by 897108861 at 2011-09-01 21:33:55
谢谢各位，找到原因了，是使用的木聚糖中含有大量的木糖。大家一般是使用什么品牌的木聚糖作为底物啊？我用的是：燕麦木聚糖(xylan from oat spelt )，Sigma （x0627 )公司产品，这个不行啊

大虾，指点一下迷津，你用的是什么牌子的木聚糖呀，急急急。

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13楼2012-11-05 15:55:45

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HarveyWang

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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
897108861(金币+1): 谢谢 2011-09-01 21:26:13

引用回帖:

1楼: Originally posted by 897108861 at 2011-08-30 22:28:45:
有测过木聚糖酶酶活的GG/MM没？本人用DNS法测的，可是对照组（使酶失活）与DNS也显色，且颜色很深。是不是用的木聚糖底物不行啊？大伙都是咋测得木聚糖酶活啊

我做的对照为
                              底物液（缓冲液）酶液          水
对照一                      1 mL                   ---             0.5mL
对照二                                                 0.5mL       1.0 mL

反应液                      1 mL                   0.5mL       ----

反应结束后DNS法显色。。。。用水做空白调零。。

对照一没有酶液，但底物木聚糖会有些颜色。
对照二一般只有甚小的吸光值，若吸光值偏高，说明酶液里有木糖或葡萄糖成分。

反应液测出的吸光值，一般要减去对照一和二的吸光值，才是酶活产生的吸光值。

所以，你的所谓对照组，有很深的颜色，一个可能是酶没有完全失活，一个可能是酶液含有单糖造成DNS吸光值升高。

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2楼2011-08-31 22:33:59

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