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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 木聚糖酶酶活
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897108861

木虫 (著名写手)

[交流] 木聚糖酶酶活

有测过木聚糖酶酶活的GG/MM没？本人用DNS法测的，可是对照组（使酶失活）与DNS也显色，且颜色很深。是不是用的木聚糖底物不行啊？大伙都是咋测得木聚糖酶活啊
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1楼 2011-08-30 22:28:45
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897108861

木虫 (著名写手)
送鲜花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by wangyangliut at 2011-09-01 16:46:32:
你重新配个底物再试，如果还是显色了，说明你样品里有木糖

仁兄，使用的什么牌子的木聚糖啊？
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7楼2011-09-01 21:35:49
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
897108861(金币+1): 谢谢 2011-09-01 21:26:13
引用回帖:
1楼: Originally posted by 897108861 at 2011-08-30 22:28:45:
有测过木聚糖酶酶活的GG/MM没？本人用DNS法测的，可是对照组（使酶失活）与DNS也显色，且颜色很深。是不是用的木聚糖底物不行啊？大伙都是咋测得木聚糖酶活啊

我做的对照为
                                底物液（缓冲液）    酶液           水
对照一                        1 mL                    ---              0.5mL
对照二                                                   0.5mL        1.0 mL

反应液                        1 mL                    0.5mL         ----


反应结束后DNS法显色。。。。用水做空白调零。。


对照一没有酶液，但底物木聚糖会有些颜色。
对照二 一般只有甚小的吸光值，若吸光值偏高，说明酶液里有木糖或葡萄糖成分。

反应液测出的吸光值，一般要减去对照一和二的吸光值，才是酶活产生的吸光值。

所以，你的所谓对照组，有很深的颜色，一个可能是酶没有完全失活，一个可能是酶液含有单糖造成DNS吸光值升高。
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2楼2011-08-31 22:33:59
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)
重复了。编辑掉。

楼主只有做了对照一和对照二，才能找到原因。

[ Last edited by HarveyWang on 2011-8-31 at 22:37 ]
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3楼2011-08-31 22:34:40
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wangyangliut

银虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
你的底物已经被降解了，需要重新配底物
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-09-01 16:44:54
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