应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 大肠杆菌培养及破碎
51/1返回列表
查看: 3196  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

fdjzhang

铜虫 (初入文坛)

[求助] 大肠杆菌培养及破碎 已有2人参与

之前培养重组大肠杆菌（宿主是BL21），诱导10h，离心然后破碎10min，菌液便可澄清，但是现在破碎破不出来，破很长时间还是白色的，不知道哪里出了问题，条件都和原来一模一样，请高手们帮帮忙啊
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-08-29 22:26:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jushi0619

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-08-30 18:42:37
正常你不管有没有表达，只要是菌体破碎了后都会变得澄清些的，颜色会变的。你确定你超声时候超声探头有效插入到菌液中了？我感觉你还是没有有效的破碎菌
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-08-30 15:06:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

shaquila

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
dhd997(金币+3): good 2011-08-30 18:42:25
如果你有做对照可以发现，破碎时间足够了，为什么不像对照一样澄清，但是对着光看，发现其实是透光的。因为重组蛋白是包函体，表达量很大，无论怎么破碎，还是不会澄清。你可以把样品进行离心，沉淀是一堆较厚白色的物体，那不是菌体，是蛋白！
赞一下(1人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

fdjzhang
2楼2011-08-30 08:54:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fdjzhang

铜虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by shaquila at 2011-08-30 08:54:10:
如果你有做对照可以发现，破碎时间足够了，为什么不像对照一样澄清，但是对着光看，发现其实是透光的。因为重组蛋白是包函体，表达量很大，无论怎么破碎，还是不会澄清。你可以把样品进行离心，沉淀是一堆较厚白色 ...

嘿嘿 谢谢回复啊 你说的对照是不加诱导剂的种子液是吗 这个我破过 破了就清了可是如果是包涵体的话 应该是么有活力的 我的有活力 之前我也一直那么做的 现在突然间做不出来了 不知道是菌变异了还是我操作有问题 斜面很长时间么有转接会影响吗 我用20度也诱导过 也还是不行 真的是不知道该怎么办 望指点
赞一下 回复此楼
3楼2011-08-30 11:06:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fdjzhang

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by jushi0619 at 2011-08-30 15:06:26:
正常你不管有没有表达，只要是菌体破碎了后都会变得澄清些的，颜色会变的。你确定你超声时候超声探头有效插入到菌液中了？我感觉你还是没有有效的破碎菌

我确定嘿 现在就是很奇怪 之前都能破出来的 现在条件和以前一样 不知道为啥就做不出来了 纠结啊
赞一下 回复此楼
5楼2011-08-30 16:48:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +4 process2012 2026-08-23 5/250 2026-08-23 19:58 by jurkat.1640
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 5/250 2026-08-23 19:43 by lXgU0RvNTDC9
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 5/250 2026-08-23 18:55 by lXgU0RvNTDC9
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 h4CP7TrQR8Lg 2026-08-22 3/150 2026-08-23 16:30 by lXgU0RvNTDC9
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 DpSrDtM079iu 2026-08-22 3/150 2026-08-23 15:33 by KM5EcsNQRBPn
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 5/250 2026-08-23 14:33 by KM5EcsNQRBPn
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办？ +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 让我中一个面上吧！ +12 大萍1987 2026-08-20 14/700 2026-08-23 10:30 by wrm
[基金申请] 今天放榜吗？ +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 10/500 2026-08-23 07:17 by OEbVnUOu01ol
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 DpSrDtM079iu 2026-08-22 3/150 2026-08-23 00:55 by OEbVnUOu01ol
[基金申请] filecode，4个jtjc了 +13 ziyangfang 2026-08-19 16/800 2026-08-22 17:08 by WH3796
[基金申请] 人气不行了 +8 fansofjerry 2026-08-21 8/400 2026-08-22 16:30 by zyqchem
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +10 kulium 2026-08-21 13/650 2026-08-21 21:58 by alongwaytogo
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧？ +4 哈哈蛤？ 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 重要消息，中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭