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fdjzhang

铜虫 (初入文坛)

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[求助] 大肠杆菌培养及破碎已有2人参与

之前培养重组大肠杆菌（宿主是BL21），诱导10h，离心然后破碎10min，菌液便可澄清，但是现在破碎破不出来，破很长时间还是白色的，不知道哪里出了问题，条件都和原来一模一样，请高手们帮帮忙啊

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1楼2011-08-29 22:26:20

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fdjzhang

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引用回帖:

2楼: Originally posted by shaquila at 2011-08-30 08:54:10:
如果你有做对照可以发现，破碎时间足够了，为什么不像对照一样澄清，但是对着光看，发现其实是透光的。因为重组蛋白是包函体，表达量很大，无论怎么破碎，还是不会澄清。你可以把样品进行离心，沉淀是一堆较厚白色 ...

嘿嘿谢谢回复啊你说的对照是不加诱导剂的种子液是吗这个我破过破了就清了可是如果是包涵体的话应该是么有活力的我的有活力之前我也一直那么做的现在突然间做不出来了不知道是菌变异了还是我操作有问题斜面很长时间么有转接会影响吗我用20度也诱导过也还是不行真的是不知道该怎么办望指点